A-204 人横纹肌肉瘤细胞

 

人横纹肌肉瘤细胞冻存时使用的DMEM培养基，复苏时使用MEM培养基，第二天发现复苏不成功，细胞没有贴壁，我又重新离心之后加入DMEM培养基，请问大神对细胞有影响吗？？之后是否可以贴壁生长？

资源名称 A-204

种属 人横纹肌肉瘤细胞

形态 上皮样

培养方法

培养基 McCoy＇sMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

传代方法 1:6~1:10传代；每周2~3次。

生长特性 贴壁生长

存储条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

这两个培养基成分差距不大，大部分细胞换用应该没什么影响。人横纹肌肉瘤细胞复苏不贴壁的话可能是：1.冻存细胞有问题，比如冻存细胞状态不是很好，冻存降温过快等；2.复苏细胞有问题，比如融化速度过慢，离心时间和转速有问题；3.细胞本身特性，有些细胞贴壁很慢，过夜不一定会都贴壁，这种情况不动是的，再离心的话细胞贴壁只会更慢。

人横纹肌肉瘤细胞爬片的步骤：

1 什么是细胞爬片？其用途是什么？

2 细胞爬片的步骤是怎样的？

3 细胞爬片需要哪些实验材料和仪器？

细胞爬片就是让细胞（贴壁细胞）在片子（盖玻片）上生长。主要用来做免疫细胞化学啊，原位杂交等吧。在做这些实验时，制作标本有两种，一是离心做细胞涂片，二是细胞爬片。利用贴壁人横纹肌肉瘤细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点，让它在盖玻片上生长，可以使制作的细胞片子更牢固，在后面的洗涤过程中，不易脱落。特别是在用粘附剂如多聚赖安酸处理过的片子上，细胞贴得更牢固。

细胞爬片：将片子放在细胞培养板（均已经消毒）中，加入一定数量的细胞悬液，让它生长24小时。待它贴壁后，细胞爬片就制作好了。

需要的器材：多聚赖安酸、合适大小的盖玻片（根据细胞培养板孔大小而定）、细胞培养板、培养基。

 

小鼠单核巨噬细胞 J774A.1 J774A.1细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

人膀胱移行细胞癌 J82 J82细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

人绒毛膜癌细胞 JEG-3 JEG-3细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

人胰腺癌细胞 JF-305 JF-305细胞 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁

人T淋巴细胞白血病细胞 Jurkat Jurkat细胞 1640+10%FBS+1%P/S  悬浮

人甲状腺癌细胞 K1 K1细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

人慢性骨髓性白血病细胞系 K562 K562细胞 IMDM+10%FBS+1%P/S 悬浮

K562耐阿霉素细胞株 K562/ADR K562/ADR 细胞 1640+10%FBS+1%P/S+1ug/ml ADR半贴壁

人间变性大细胞淋巴瘤细胞 Karpas-299 Karpas-299细胞 1640+10%FBS+1%P/S  悬浮

人慢性粒细胞白血病细胞 KCL-22 KCL-22细胞 1640+10%FBS+1%P/S  悬浮

人外周血嗜碱性白血病细胞 KU812 KU812细胞 1640+10%FBS+1%P/S  悬浮

人正常肝细胞 L-02 L-02细胞 1640+20%FBS+1%P/S 

人霍奇金淋巴瘤细胞 L428 L428细胞 1640+10%FBS+1%P/S  悬浮

L5718 L5718 细胞 1640+10%FBS+1%P/S  悬浮

小鼠成纤维细胞 L929 L929细胞 MEM+10%HS + 1%P/S 贴壁

人神经内分泌分化的结肠癌细胞上皮细胞 LCC18 LCC18细胞 1640+10%FBS+1%P/S 

仓鼠卵巢细胞 LEC-1 LEC-1细胞 MEMα 90%；胎牛血清，10%。+ 1%P/S 松散贴壁

人胶质瘤细胞 LN229 LN229细胞 DMEM+5%FBS+1%P/S  贴壁