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CRISPR/Cas9 基因敲除细胞株（多克隆）

产品信息
  • CRISPR/Cas9基因敲除细胞株（多克隆）

    CRISPR/Cas9敲除技术
           CRISPR/Cas9敲除技术的原理是Cas9结合到sgRNA上，sgRNA的引导序列与基因组DNA中的靶标序列结合，Cas9切割靶标序列产生双链断裂，迫使细胞进行紧急修复，通常条件下，细胞偏向于使用非同源末端连接（NHEJ：nonhomologous DNA end joining）的方式对断裂的双链进行修复，从而造成靶位点基因的插入或缺失突变，发生移码突变可以完全敲除目标蛋白。
    CRISPR/Cas9基因敲除技术是继TALEN基因敲除技术之后又一大突破，具有操作简便，周期短，敲除效率高，作用靶点多，无基因、细胞及物种限制，目的基因的大小不受限制，不受转录本数量影响等优势，逐渐成为基因敲除的标准操作工具。
     

    CRISPR/Cas9敲除细胞株（多克隆）的服务流程 
    1、针对敲除目的基因设计合适的靶点，构建3个CRISPR/Cas9敲除质粒并测序验证。
    2、分别将3个CRISPR/Cas9敲除质粒转染293T细胞，利用T7EⅠ试验筛选出编辑效率ZG的CRISPR/Cas9敲除质粒。
    3、用编辑效率ZG的CRISPR/Cas9敲除质粒包装慢病毒，并且检测慢病毒的滴度。
    4、用慢病毒感染目的细胞，抗性筛选获得CRISPR/Cas9敲除多克隆细胞。
    5、利用T7EⅠ试验检测CRISPR/Cas9敲除多克隆细胞的编辑率。

    客户提供信息 
    1、待敲除目的基因的名称和编号(gene ID)。
    2、需构建敲除株的细胞信息。


    实验结果交付 
    1. CRISPR/Cas9敲除多克隆细胞。
    2. CRISPR/Cas9敲除质粒。
    3. CRISPR/Cas9敲除质粒的序列，酶切鉴定、测序结果。
    4. T7EⅠ试验检测结果。
    5. 说明实验过程中所用的耗材、仪器设备和操作过程的实验报告一份。
     
    服务周期：2-3个月。



    联系我们
    咨询热线：020-29039963  18816893417
    QQ：3498275176    邮箱：sales@hyymed.com
     
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