病理学服务：原位末端凋亡法（Tunel）实验技术服务

地区：	北京/全国
简介：	经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤，即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞
提供商：	北京亿鸣复兴生物科技有限公司
服务名称：	TUNEL细胞凋亡检测

TUNEL细胞凋亡检测 (TUNEL Apoptosis Assay) 是一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品，经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤，即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现 180-200bp的DNA ladder。
基因组DNA断裂时，暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP)，随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合，ZH在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞。
服务内容

1. 组织切片/细胞爬片
2. 常规TUNEL检测
3. 荧光TUNEL试剂盒检测
4. 数据整理及结果分析
5. 根据客户需要对细胞核进行荧光染色

客户须知：

1. 由客户提供荧光TUNEL检测试剂盒
2. 本公司保证数据的客观性、准确性，但不保证与客户预期吻合

服务价格及周期：

服务项目	服务内容	价格
组织切片	常规切片	20元/片
常规TUNEL	DAB显色法TUNEL检测，成像分析	350元/样本
荧光TUNEL	使用荧光TUNEL检测试剂盒，荧光成像分析	280元/样本
数据分析	成像分析及数据统计	套餐内（免费）

交货时间： 15~20天 
提供结果：

1. 成像图片（或按客户需要排列图片，达到可直接发表水平）
2. 实验详细流程
3. 原始数据
4. 标记后（处理后）的样本

样本要求：

1. 悬浮生长培养细胞的甩片或涂片
2. 贴壁生长的培养细胞 
3. 冰冻切片 
4. 常规石蜡切片 

取材保持组织新鲜（组织块以小于2cm×1.5cm×0.3cm为宜），立即放入固定液（固定液用10%液或4%多聚甲醛缓冲液，体积为组织块的10倍以上）中，避免干燥；对于有血迹的样本，可用PBS液或生理盐水冲洗后直接放入固定液中；经固定后的样本必须在48小时内处理。
注意事项：

1. 结果分析时注意：在坏死的晚期阶段或在高度增殖/代谢的组织细胞中可产生大量DNA片断，从而引起假阳性结果；而有些类型的凋亡性细胞死亡缺乏DNA断裂或DNA裂解不完全，以及细胞外的矩阵成分阻止TdT进入胞内反应，进而产生假阴性结果。
2. 初次检测细胞凋亡，设置阳性对照片。血细胞含量高的组织，尽可能延长过氧化氢的灭活时间。苏木素的复染时间需要摸索。
3. 每片所加试剂可调整，一般30~100 ul不等，但也要防止液体挥发而干片，且反应均在放置湿盒内。

有需要细胞凋亡检测服务的老师请联系 印磊
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