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基因过表达/慢病毒包装/慢病毒构建

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  • 基因过表达/慢病毒包装/慢病毒构建

     

    慢病毒(Lentivirus)是一类改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒载体。是一种RNA病毒,可以利用逆转录酶将外源基因整合到基因组中实现稳定长时表达。

    和元上海提供的慢病毒生产和指控采取了国际学术界公认的标准流程,采用三质粒系统在293T细胞中进行包装。所获得的慢病毒颗粒经过超速离心纯化,并通过qPCR对慢病毒基因拷贝进行滴定。一般情况下我们生产的慢病毒滴度在108~109TU/ml,完全可以满足各类实验的使用要求。

    服务简介:

    和元上海根据客户提供的基因信息,从生物信息学网站上调出该基因的cDNA序列,将cDNA序列构建到慢病毒载体,生产的病毒颗粒可以直接用于感染细胞或者动物实验。

    慢病毒具有感染范围广、持续表达等特点,主要用于难感染的细胞转染,如干细胞、免疫细胞(如DC细胞)和肿瘤细胞等。慢病毒的转染效率高和能持续表达的特点促进了基因表达的效果,可以用来标记和追踪体内的干细胞、肿瘤细胞和白细胞,也可以用作体内的基因传递ZL,或单细胞胚胎制备转基因动物。

    服务流程:

    服务优势:

    对分裂期细胞和非分裂期细胞均有感染作用;

    操作方便,安全性高;

    干扰稳定GX;

    实验周期短;

    多种载体可选。

    可供选择的病毒载体:

    载体名称 包装容量 载体特点
    pLenti-CMV-MCS-EGFP-3FLAG 2.8kb 融合EGFP-3FLAG
    pLenti-CMV-MCS-EGFP-3FLAG-PGK-puro 1.6kb 融合EGFP-3FLAG,带puro抗性
    pLenti-CMV-EGFP-P2A-MCS-3FLAG 2.7kb 带EGFP,融合3FLAG
    pLenti-CMV-HA-MCS-3FLAG-PGK-EGFP-T2A-puro 1.5kb 带EGFP和puro抗性,融合3FLAG、HA
    pLenti-CMV-MCS-EGFP-3FLAG-PGK-Zeo 1.8kb 融合EGFP-3FLAG,带Zeo抗性
    pLenti-CMV-MCS-EGFP-3FLAG-IRES-puro 1.6kb 融合EGFP-3FLAG,带puro抗性
    pLenti-CMV-MCS-3FLAG-EGFP 2.8kb 融合3FLAG
    pLenti-CMV-MCS-3FLAG-EGFP-PGK-puro 1.6kb 融3FLAG-EGFP,带puro抗性
    pLenti-CMV-MCS-HA-3FLAG-P2A-EGFP-T2A-puro 2kb 带EGFP和puro,融合HA-3FLAG
    pLenti-CMV-MCS-HA-3FLAG-P2A-EGFP 2.7kb 带EGFP,融合HA-3FLAG
    pLenti-CMV-MCS-3FLAG-IRES-EGFP 2.1kb 带EGFP,融合3FLAG
    pLVX-AcGFP-N1 1.7kb 可选gene-AcGFP1表达框
    pLenti-Ubc-MCS-EGFP-3FLAG-IRES-puro 1.0kb 融合EGFP-3FLAG,带puro抗性
    pLenti-Ubc-EGFP-3FLAG 2.3kb 融合EGFP-3FLAG
    pLenti-Ubc-MCS-HA-3FLAG-P2A-EGFP-T2A-puro 0.6kb 带EGFP和puro,融合HA-3FLAG
    pLenti-EF1a-MCS-EGFP-3FLAG-PGK-puro 1.7kb 融合EGFP-3FLAG,带puro抗性
    pLenti-EF1a-EGFP-P2A-puro-CMV-MCS - 适合lncRNA,带EGFP和puro
    pLenti-TRE-MCS-EGFP-3FLAG-PGK-puro 1.8kb 可调控,融合EGFP-3FLAG

    备注:

    1)由于载体种类很多,只列举一部分。将上述载体中EGFP标记换为mcherry标记的载体也有。

    2)Ubc启动子的载体适合在干细胞、原代细胞和离体神经元中表达。

    病毒相关技术服务:

    基因过表达      miRNAYZ      miRNA表达      RNA干扰     基因组编辑      CRISPR/Cas9服务

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