脑血栓形成动物模型——技术服务
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【基本原理】
该模型通过手术建模,具有以下优点:①直接插管至MCA起始部诱导血栓形成,梗死灶的大小和部位稳定;②由凝血酶诱导血栓形成,更接近于临床脑梗死的病理特点,血栓的组成成分与颈总动脉硬化斑块相似;③对溶栓ZL有良好的反应性。此模型操作简便,缺血效果可靠,梗死部位恒定,较接近人类脑血栓形成的临床特点,适用于评价溶栓治LX果的实验研究。
【模型特点】
动物在术后12h之内有死亡发生,死亡率为10%-15%。模型成功率约为总手术动物的60%。手本显微镜下观察大脑动脉环可看到栓子位于MCA起始处,脑梗死体积面积占对侧大脑半球体积的百分比的45%左右。光镜下可见尾状核、壳核、丘脑前部及外侧部、海马和额顶叶皮质表现为缺血性病变,神经元肿胀、坏死,组织间隙水肿。大脑中动脉起始部栓子主要成分是纤维蛋白、血小板、白细胞和红细胞。
【模型应用】
1. 脑血栓的相关机制研究;
2. 脑血栓相关药物筛选和LX评价;
3. 比较医学研究。
【实验动物】
大鼠
【实验方法】
大鼠,体重为280-300g雌雄不拘。准备一个PE-50导管经一软管接微量加样器,手术前充满凝血酶(1×106U/L)。经腹腔注射 Pelltobarbitalum Natricum(按50-60mg/kg体重的剂量)或水合氯醛(按350-400mg/kg体重的剂量)麻醉后使动物仰卧位固定于手术台上,剃除颈部毛发,手术区域消毒。取颈部正中切口,钝性分离颈部肌肉,游离出双侧颈总动脉(CCA)、左侧颈外动脉(ECA)。分离、结扎并离断左侧ECA分支,在颈动脉分叉远端7~10mm处用5-0 尼龙线将ECA结扎并离断,留取远端线头下拉,使其与颈内动脉(ICA)接近一直线。分离左侧ICA,轻轻剥离迷走神经,至鼓骨下缘可见ICA惟一颅外分支翼腭动脉,结扎该动脉,使 ICA成为CCA颅外惟一保留动脉。用微动除夹夹闭 ICA及CCA,用尼龙线在ECA起始处打一松结,在ECA上距颈动脉分叉约3mm处剪一小口,从此小口将导管插入ECA管腔,并进入ICA,将ECA起始处的尼龙线扎紧以防导管移动及出血。移走ICA上的微动脉夹,继续插入导管约10mm,此时,导管前端距MCA起始部2-3mm。抽取约10μL动脉血进入导管,停留约10min以形成栓子,暂时用微动脉夹夹闭对侧CCA以降低脑血流,然后将导管中的栓子连同约10U凝血酶缓慢注入ICA。5min后移走右侧CCA上的微动脉夹;10min后拔出导管,结扎ECA近端;15min后移走左侧CCA上的微动脉夹,缝合皮肤,单笼饲养。
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