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超低分子量蛋白电泳试剂盒哪里卖

产品信息
  • 特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
     

    北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖超低分子量蛋白电泳试剂盒哪里卖在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。


    超低分子量蛋白电泳试剂盒哪里卖
    产地:国产|进口
    品Pai:百奥莱博
    编号:RFT078
    规格:10次
    ● 产品组成:组分 名称 规格 贮存 运输
    组分1 2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 15 ml 4℃ 常温
    组分2 2×多肽电泳分离胶缓冲液 30 ml 4℃ 常温
    组分3 2×PAA溶液 超低浓缩胶用 15 ml 4℃ 常温
    组分4 2×PAA溶液 超低分离胶用 30 ml 4℃ 常温
    组分5 10% APS(干粉) 5 ml 常温 常温
    组分6 TEMED 0.5 ml 常温 常温
    组分7 10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS) 500 ml(干粉) 常温 常温
    组分8 2×Tricine 上样缓冲液(含还原剂) 1 ml -20℃ 常温
    组分9 FastBlue蛋白染色液 500 ml 常温 常温
    ● 产品简介:
    本试剂盒含有超低分子量蛋白电泳(多肽电泳)全*("套")试剂,可以用来检测1-20kd的多肽大小。本试剂盒可配制至少10块常规大小的PAGE胶(8×10cm)。具有以下特点:1 适用范围广:2×多肽电泳缓冲液和2×PAA溶液中不含有SDS,适用于多肽的变性和非变性电泳。
    2 分辨率高:凝胶缓冲液独特配方,可以有效分离1-5kD多肽。
    3 稳定性高:凝胶缓冲液pH为中性,存放时间长。
    4 使用方便:配制凝胶时只需1:1混合2×凝胶缓冲液和2×PAA溶液,加上APS和TEMED即可配制凝胶。
    ● 贮存和效期:按照标签温度贮存;开封后有效期一年。
    ● 使用说明:一. 10% APS配制:10% APS配制-5 ml:将APS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10% APS。
    二. 制胶:I 配制分离胶
    1.按照表一将不同体积的成分加入到小烧杯或离心管中混合;立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
    表一 (一块1 mm mini胶用量)*
    分离胶 浓缩胶
    18%T /5 ml 5%T /2 ml
    2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 / 1 ml
    2×多肽电泳分离胶缓冲液 2.5 ml /
    2×PAA溶液 超低浓缩胶用 / 1 ml
    2×PAA溶液 超低分离胶用 2.5 ml /
    10%APS 45-60 μl** 20-30 μl
    TEMED 5 μl 2 μl
    注: * 如非必须,不要使用厚度1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75m和1mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
    ** 凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据表二的标准条件调节催化剂的加入量。
    表二 超低凝胶制备凝固时间表
    环境温度 20℃
    分离胶配制 浓缩胶配制
    分离胶配制量 5 ml -
    浓缩胶配制量 - 2 ml
    10%APS 50 μl 20 μl
    TEMED 5 μl 2 μl
    凝固时间 5-10 分钟 20-30 分钟
    2.在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的无水乙醇层,使凝胶表面保持平整。
    3.静置5-10分钟,待分离胶和乙醇层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
    II 配制浓缩胶
    去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
    1.按照表一将不同成分加入到小烧杯或离心管中混合;立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
    2.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
    3.静置20-30分钟待凝胶聚合
    三. 电泳:10×Tricine-Tris-SDS缓冲液配制:将10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS)粉末(Cat No:CB010P)置于一干净的一升烧杯中,加入500ml超纯水,彻底搅拌混匀,不要调节pH,即配成500ml 10×TTS缓冲液。
    表三 1×TTS缓冲液配制
    1×TTS配制量 500 ml 1×TTS配制量 1000 ml
    10×TTS 50 ml 100 ml
    超纯水 450 ml 900 ml
    注:伯乐Mini III电泳槽一次电泳使用500ml 1×TTS缓冲液。
    将电泳槽的内槽加满1×TTS缓冲液,轻柔拔出梳子,用1ml移液器将梳孔吹洗干净,将Marker或蛋白样品(已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:TP050]处理)加入点样孔,稳压电泳(表四),至蓝色指示前沿至分离胶下沿位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2.5-3个小时。
    表四 多肽电泳条件
    恒电压 150V
    起始电流 60-75mA/板胶
    结束电流 15-25mA/板胶
    电泳时间 2.5-3小时

    四. 染色(使用组分9-FastBlue蛋白染色液):● 用前必读:1 使用前如发现瓶中有少许沉淀,请混匀后使用。
    2以下“使用方法”是针对0.75mm和1.0 mm厚度,10×10cm凝胶染色程序。
    ● 使用方法:1. 将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中,加入适量染色液(以刚刚覆盖过胶面为适),条带1-2分钟即可见。
    2. 摇床上常温摇动10-15分钟。
    3. 观察结果。
    ● 注意事项:1. 使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm和1mm的凝胶,如果使用更大面积或更厚的凝胶,请加入更多的染色液并延长染色的时间。
    2. 常规染色所需的漂洗,固定,脱色步骤都无必要。
    3. 本染色液可以重复利用1-2次,敏感性会有轻微下降,请延长染色时间。
    4. 本染色液有轻微腐蚀性,请带手套操作。使用后,请盖好瓶盖,常温密封保存。

    更多有关超低分子量蛋白电泳试剂盒哪里卖的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
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    ·1×Western湿转转膜液
    编号:RFT080
    英文名称:Western Transfer Buffer
    规格:1L(粉末)
    1×Western湿转转膜液可以用于Western时湿法电转膜。
    本Western转膜液是一种安全无毒的转膜液,没有使用剧毒的甲醇,也没有使用其它的有毒试剂。
    本Western转膜液配制便捷,无需调节pH值。
    本Western转膜液可以回收,回收后可以再使用2-3次。
    保存条件: 室温保存,两年有效。
    使用说明:1. 取一袋可以配制1升Western转膜液的粉剂,倒入到一洁净的烧杯中,加入蒸馏水到约700毫升,溶解。
    2. 再加入200毫升无水乙醇或210毫升95%乙醇,混匀。
    3. 然后在量筒中用蒸馏水定容到1升。混匀后即可使用。没有用完的转膜液可室温保存,通常两周内使用没有任何问题。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时,应该丢弃。

    ·λ DNA/HindIII+EcoRI(564-21226bp)
    编号:RFT027
    英文名称:Western Transfer Buffer
    规格:100次
    ● 产品简介:
    本产品是由λ DNA经HindIII和EcoRI完全双酶切而成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。产品浓度为0.1μg/μl,已含有1×loading buffer,可直接取2-5μl上样,使用方便。12条带的大小分别为564,831,947,1375,1584,1904,2027,3530,4268,4973,5148,21226bp。
    ● 储存条件:4℃ 贮存(长期贮存置于-20℃)。
    ● 使用方法和说明:1.65℃加热5分钟,立即冰浴3分钟,取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
    注:根据梳子的厚度和宽度进行上样。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl。窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
    2.建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度8-10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间45分钟。
    3.通过EB染色后紫外灯下观察条带。
    注:如果使用Goldview等染料就行染色,由于灵敏度比EB低,请酌情增加Marker的上样量。
    ● 注意事项:1.λ DNA酶切Marker的末端容易由COS末端结合在一起,电泳前65℃预热5分钟能解开结合的COS末端,得到更清晰的电泳图像。如果不预热,21226bp和3530bp会结合形成24756bp的额外片段,同时电泳后3530bp亮度会明显弱于其他片段。
    2.琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
    3.请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。



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