乙醇诱发的肝纤维化动物模型——技术服务

 

乙醇诱发的肝纤维化动物模型

 

【基本原理】

 

乙醇与肝纤维化发生关系密切。乙醇自从胃肠道被吸收后，经机体酶系氧化生成乙醛，并可继续被氧化成乙酸盐。乙醇转变成乙醛及乙醛转变成乙酸盐或乙酰辅酶A（NAD）的过程中还可产生还原性烟酰胺腺嘌呤二核甘酸（NADH），而NAD/NADH比例下降使肝内三羟酸循环受抑、糖异生作用减弱以及脂防酸合成增加，当其增多超过肝脏的处理能力就形成脂肪肝，ZZ形成肝纤维化，根据人类酒精性肝病的病因和发病机制，采用在饲喂固体饲料的同时给大鼠胃内连续24周灌入乙醇的方法，复制了可在不同时期观察动物一般行为活动、血清生化指标和组织形态学方面变化的大鼠模型。该模型的主要特点可以通过生化和形态学指标来观察和评价単因素乙醇诱发的除酒精性肝硬化以外的慢性酒精性肝病各阶段的病理改变，比较符合人类临床实际，且纤维化成膜率高、模型稳定、造模周期相对较短、方便操作、价格低廉，在国内已被广泛的应用。

 

【模型特点】

 

造模4周时动物出现流涕、体态呆板、嗜睡、精神表靡、食欲减退和行动迟缓等现象，血清天冬氨酸转氨酶（AST）碱性磷酸酶（ALP）含量升高，总蛋自（TP）和球蛋自（GP）含量下降，部分大鼠肝组织中相邻肝小叶的ZY区-汇管区出现桥接坏死，坏死区内可见大量炎细胞浸润，以中性粒细胞为主，表现为中-重度炎症变化；12周时动物毛发光泽变少，体重增长缓慢，经常溏泻，肝脏体积变大，色泽暗谈，质地偏硬，大部分动物肝组织出现不同程度的水样变性及气球样变性，以肝包膜下的肝细胞为明显，且肝细胞脂肪变性加重，脂滴增多；24周时动物血清AST继续维持在较高水平，ALP从高位恢复至正常范围，白蛋白（ALB）含量显著下降，在肝门管区的小动脉、静脉，肝小叶ZY静脉、肝窦处可见血液淤滞，ZY静脉内出现透明血性，部分ZY静脉扩张，基底膜增厚。血管内皮细胞及窦内皮细胞肿胀，胶原纤维沿窦壁沉积，呈铁丝网格状或龟壳样，范国较广，汇管区及其周围亦可见到，严重者ZY静脉及汇管区胶原纤维增粗，小叶内出现纤维分隔。

 

【模型应用】

 

          1.  肝纤维化的相关机制研究；
          2.  肝纤维化相关药物筛选和LX评价；

          3.  比较医学研究等。      

 

【实验动物】

 

大鼠

 

【实验方法】

 

 

成年大鼠，灌胃给白酒（φ（C2H5OH）=0.56）7 g/kg体重，每日晨1次，连续24周。或灌胃给白酒-玉米油-吡唑混合液，每日晨1次，连续12周。混合液中各组分摄入量比例分别为：每日自酒（φ（C2H5OH）=0.56）8-12/kg体重，玉米油2 g/kg体重，吡唑24 mg/kg体重，另外间断高脂饲料。其中，乙醇摄入量是随时间的延长而逐步递增的，乙醇剂量计算采用下列公式，乙醇剂量（g）=白酒体积（ml）x白酒体积分数（0.56）x乙醇相对密度密度（0.8 g/ml）。造模过程中，每日观察动物一般状況及体重的经时变化，造模毕，抽取全血制备血清作血清生化检测，摘取肝脏称其湿重，换算成脏器系数，并作组织形态学检查。

 

 

 

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