胆总管结扎诱发的肝纤维化动物模型——技术服务

 

胆总管结扎诱发的肝硬化动物模型

 

【基本原理】

 

肝外胆管梗阻可以引起梗阻部位以上胆管扩张、胆汁淤积、胆管内压力ZG，并可引发肝内胆小管扩张破裂。由于肝内血管受到扩张胆管的压迫及胆汁外渗，干细胞会发生缺血和坏死，纤维组织向胆管伸展，包围肝小叶并散布于肝细胞周围，导致纤维增生，甚至发展为胆汁性肝纤维化。采用逆行性注入组织胶（TH胶）加胆总管结扎诱发的肝纤维化动物模型具有明显的胆汁性肝纤维化的特征。

 

【模型特点】

 

该模型主要特点是模型动物炎症反应程度较轻，肝纤维化形成速度较快，自发逆转率较低，具体表现在，造模手术后，肝细胞坏死不明显。反映肝细胞损伤程度的血清ALT水平仅在术后1 d急性大幅升高，此后快速回跌。本模型之所以能够较长时间维持模型动物肝纤维化状态，在造模手术过程中向胆管内注入TH胶或N-丁基-2-氰基丙烯酸盐是其技术关键。因为通过这种手段，在技术上保证了胆管的完全阻塞，尤其是肝内胆管的阻塞。
 

鉴于本模型具有造模方法简单，成模周期较短，维持时间较长，病理特征明显，且可动态采用非创伤性的血清学指标，目前，已有不少文章选用本模型进行有关肝纤维化的研究。

 

【模型应用】

 

          1.  肝纤维化的相关机制研究；
          2.  肝纤维化相关药物筛选和LX评价；
          3.  比较医学研究：本模型比较适用于研究肝纤维化的形成机理和评价药物抗纤维化的LX。

 

【实验动物】

 

大鼠

 

【实验方法】

 

 

成年大鼠，麻醉后打开腹腔，在十二指肠降部肠系膜中，寻找和游离胆总管，在其下穿2根丝线，向肝脏方向做“V”字切口，用1 ml注射器向近端注入组织胶（TH胶）或N-1丁基-2-氰基丙烯酸盐0.3 ml/kg体重的量，行双重结扎并剪断胆总管。手术毕，常规饲养8周。期间，注意观察动物的一般活动状况和体征，动态眼眶取血制备血清作丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、结合胆红素（DBIL）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）、透明质酸（HA）和层连蛋白（LN）含量检测，造模结束，摘取肝脏制备匀浆作羟脯氨酸（Hyp）含量测定，并按光镜和电镜要求，分别取材作肝组织形态学检査。
 

 

 

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