大鼠动脉粥样硬化动物模型——技术服务

 

大鼠动脉粥样硬化动物模型

 

【基本原理】

 

根据动脉粥样硬化发病机制有关脂质浸润学说和损伤-反应-炎症学说的原理，采用高脂高胆固醇饲料长期喂养，并在高脂饲料配方中增加胆酸钠提高胆固醇吸收量，或在高脂饲料配方中增加YZ甲状腺功能的药物如丙硫氧嘧啶或甲巯咪唑，降低胆固醇的氧化和分解，从而升高血胆固醇含量，导致大鼠出现高脂血症；通过给予大剂量维生素D诱发高钙血症或球囊拉伤等机械作用引起血管内膜损伤和炎症反应，随时间的延长逐渐形成动脉粥样硬化模型。

 

【模型特点】

 

 1.  单纯给予大鼠高脂饲料不易形成动脉粥样硬化病变；
 

 2.  给予大鼠高脂同料加维生素D负荷可导致纤维和平滑肌增生样的动脉粥样硬化，未见成熟的动脉粥样硬化斑块形成；
 

 3.  给予大鼠高脂饲料及维生素D负荷的同时，予以球囊损伤动脉，可形成与人类动脉粥样硬化相似的较成熟的动脉粥样硬化斑块模型。

 

【模型应用】

 

          1.  动脉粥样硬化相关机制研究；
          2.  药物筛选；
          3.  药物验证等。

 

【实验动物】

 

 Wistar或SD大鼠，雌雄不拘。

 

【实验方法】

 

实验用Wistar雄性大鼠，3-4月龄，体重200 g左右。随机分为4组。

    1）正常对照组，喂基础饲料。

    2）单纯高脂组，以高脂饲料（2%胆固醇、0.5%胆酸钠、3%猪油、0.2%丙硫氧嘧啶、94.3%的基础饲料）喂养。

    3）高脂维生素组，在喂高脂饲料的基础上加维生素D₃粉剂（1.25 x 10⁶ IU/kg饲料）喂养，实验开始时于右下肢肌内注射维生素D₃针剂（3 x 10⁵ IU/kg体重），每隔30 d重复1次。

   4）内皮损伤组，在给予高脂维生素组相同处理的基础上，于第7天行大鼠主动脉内膜球囊损伤术。Pelltobarbitalum Natricum腹腔注射麻醉（30 mg/kg），背位固定，无菌条件下作颈正中切口，分离左颈总动脉，结扎远心端，向心脏方向插入1.5 F球囊，进入8 cm后，注入0.2 mL生理盐水充盈球囊，手感到一定阻力向回拉约4-5 cm，放水后进入8 cm，注水充盈、回拉、放水，反复3次，拔出球囊，结扎近心端。

    实验第90天，各组动物禁食12 h，Pelltobarbitalum Natricum腹腔注射麻醉，分离腹主动脉，在肾动脉分叉处下方，剪开腹主动脉，插入穿刺针，以注射器采集动脉血，3000 r/min离心15 min，分离血浆，取1 mL检测血脂和血钙；剪下主动脉，取胸主动脉下段约1 cm，10%甲酸固定，进行常规形态学和免疫组织化学检查。