YT130 细胞凋亡与坏死检测试剂盒

品Pai：百奥莱博

规格：100次

英文名：Apoptosis and Necrosis Assay Kit

编号：YT130

本试剂盒提供了一种经典而又快速简便的细胞凋亡与细胞坏死检测方法。染色快速方便，两种染料的染色仅需20-30分钟，一步染色即可完成。使用方便，使用流式细胞仪检测时，无需稀释等配制过程，也无需再准备其它任何溶液。本试剂盒足够检测100个样品，每个样品的细胞数量可以为10-100万。



试剂盒组份：

细胞染色缓冲液———100ml

Hoechst染色液———0.5ml

PI染色液——————0.5ml



本试剂盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)双染的方法。细胞发生凋亡时，染色质会固缩。

Hoechst 33342可以穿透细胞膜，染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。碘化丙啶(PI)不能穿透细胞膜，对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞，其细胞膜的完整性丧失，碘化丙啶(PI)可以染色坏死细胞。上述两种染料双染后，使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时，正常细胞为弱红色荧光＋弱蓝色荧光，凋亡细胞为弱红色荧光＋强蓝色荧光，坏死细胞为强红色荧光＋强蓝色荧光。参考下图，左图为诱导凋亡前的正常细胞，右图为诱导凋亡后的细胞。







注意事项：

1. 需使用流式细胞仪进行红色和蓝色双荧光检测。也可使用荧光显微镜检测。

2. 染色后宜尽快检测。

3. Hoechst 33342对人体有害，碘化丙啶(PI)对人体有刺激性，请注意适当防护。



储存条件：-20℃避光，有效期一年。



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·CENP-EYZ剂(GSK923295)

编号：YT932

英文名称：CENP-E Inhibitor

规格：10mM×0.2ml|5mg|25mg

本品是一级特异性变构YZ剂CENP-E驱动蛋白ATPase的变构YZ剂，Ki为3.2nM，对突变型I182和T183作用效果稍弱。



CAS：1088965-37-0

分子式：C32H38ClN5O4

分子量：592.13

纯度：98.3%

结构式：





GSK923295是一个有效的，选择性有丝分裂驱动蛋白着丝粒相关蛋白-E(CENP-E)YZ剂。GSK923295与ATP和微管(MT)非竞争性地YZCENP-E MT刺激的ATPase活性，Ki为3.2nM，比其他驱动蛋白选择性高。GSK923295YZ无机磷的释放，稳定CENP-E马达域与微管相互作用，降低ATP促进的CENP-E从MT(koff，MT)的分解率，超过50倍。GSK923295导致中期染色体排列失败，诱导有丝分裂停滞。GSK923295作用于237种肿瘤细胞系，有效YZ肿瘤细胞生长，平均GI50为253nM，中位数GI50为32nM。当有丝分裂原活化蛋白激酶(MEK/ERK)信号也受YZ，GSK923295更有效YZ肿瘤细胞生长。



储存条件：-20℃，有效期12个月。





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·封闭液(10X浓缩,不含去垢剂)

编号：YT877

英文名称：Blocking Buffer(10×)

规格：100ml

本品是新一代的快速GX封闭液，总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品，可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等实验中的封闭、一抗或二抗的稀释。本产品为10倍浓缩(10X)溶液，不含去垢剂。按照每张膜封闭需要5-10ml 封闭液(1X)计算，一个包装的本产 品可以封闭100-200张膜。



本封闭液快速GX。封闭时间通常仅需5-15分钟，并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及国外同类的快速 封闭液相比，显示出更强的信噪比(参考下图)。



本封闭液封闭后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白，确保极高的信噪比。



本封闭液兼容性好，兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗。本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂，不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素，不会干扰基于生物素的检测。



本封闭液使用灵活。本产品配制在含有适当浓度Triton X-100的TBS中，可以直接用于相关实验，但也可以根据实验需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至终浓度为0.05%-0.1%后用于封闭、一抗或二抗的稀释。



本产品与BSA及国外同类产品的封闭效果对比参见下图。在相同样品和实验条件下，仅封闭液及封闭时间存在如下图所示的差异时，我公司的本封闭液封闭后的整体背景明显低于BSA封闭后的背景，而且目的条带亮度明显高于国外同类品Pai产品。





每组实验从左到右依次为：5μl蛋白Marker，2.5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液，5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液。请注意对于抗体A，本封闭液比BSA和国外同类产品具有更低 的背景，并且和国外同类产品相比信号明显更强。对于抗体B，本封闭液比BSA具有更低的背景，和国外同类产品相比信号明显更强。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。



注意事项：

1. 本产品推荐仅使用一次，重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比 很高的一抗，例如一些内参抗体，本封闭液可以重复使用2-3次。回收的封闭液请勿与未使用过的封闭 液混合。

2. 通常本产品用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对 于一些背景非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外，如有特殊需要，也完全可以 4℃封闭过夜。

3. 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的，因此对于一些特殊的实验，可能需要 根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。

4. 取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子，并仅轻轻夹取其边角，操作过程须避免 膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。

5. PVDF膜一经浸润和活化，需一直保持湿润，根据Western进行 到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中，否则可能会产生难以封闭的异常背景。

6. 在背景较高的情况下，为进一步提高信噪比，本产品稀释至1X后可以自行添加 Tween-20或Triton X-100至终浓度为0.05%-0.1%。



储存条件：4℃，有效期一年。

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