QN1132 增强型DAB显色试剂盒

规格：3ml|10ml

产地：国产|进口

英文名：metal Enhanced DAB Substrate Kit,20×

品Pai：百奥莱博

增强型DAB显色试剂盒是一种借助辣根过氧化物酶(HRP)，用于免疫组化显色、原位杂交显色或 Western、 Southern 、Northern、EMSA 等膜显色的试剂盒。 DAB(二氨基联苯胺)是辣根过氧化物酶的常用底物。在 辣根过氧化物酶的催化下，DAB 会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇。 本产品采用特殊配方，灵敏度高，背景低，重复性好，储存稳定，使用方便，适合于蛋白印迹、免疫组织 化学和免疫细胞化学、斑点印迹和生物芯片等的染色和显色反应。



操作说明：

1. 对于组织切片或蛋白质印记膜，在与辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适 当洗涤液洗涤 3-5 次，每次 3-5 分钟。

2. 向 5ml 蒸馏水中加入 250 μl 溶液 A、250 μl 溶液 B、250 μl 溶液 C，并混合均匀，即为 DAB 工作液，1h 内使用。注意：溶液 A/B/C 必须完全融化后使用。

3. 向组织切片或膜上加入适量 DAB 工作液，确保能充分覆盖样品。

4. 室温避光孵育 1-30 分钟，显色时间过长可引起本底ZG，故应密切观察显色过程(一般3-10分钟理想)， 并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。

5. 对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后可对其进行其他染料复染。对于膜，显色反应终止后，可以室 温晾干避光保存。



注意事项：

1．DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出，应确保结晶完全溶解再行使用;

2．显色工作液应现用现配，新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色，如颜色过深，请勿使用;

3. DAB在常温下不稳定，每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱，以免因 DAB 分解影响实验，或因渗 漏造成实验环境污染。

4. DAB有潜在致突变作用，操作时应注意穿戴好防护用具。

5. DAB溶液C成分为H2O2,该组分易降解，必要时可自行配备。



储存条件：-20℃避光密闭，有效期至少1年。



想要了解更多关于增强型DAB显色试剂盒现货促销的价格、品Pai、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品：



·海藻酸钠

编号：QN0701

英文名称：Sodium alginate

规格：100g|500g

>CAS号：9005-38-3

分子式：C5H7O4COONa

分子量：198

性状：无色或淡黄色细丝颗粒或粉末状固体

储存条件：RT



·三氯乙*(代"酸")

编号：QN0630

英文名称：aceto-caustin

规格：100g

本品常用来沉淀蛋白质，测定蛋白质含量.



别名：三氯醋酸

CAS号：76-03-9

分子式：C2HCl3O2

分子量：163.39

性状：白色或类白色结晶性粉末

储存条件：2～8℃



·核蛋白提取试剂盒

编号：QN1079

英文名称：Nuclear Protein Extraction Kit

规格：50T|100T

本核蛋白提取试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。得到的蛋白可以用于Western blot等实验。本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂，释放出胞浆蛋白，再通过离心得到细胞核。然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。本试剂盒可以抽提50/100个样品(每个样品约2×106个Hela细胞或40mg组织)。



体外培养细胞的操作方法(裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行)：



1．根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF，使PMSF的终浓度为1mM。PMSF需现用现加，若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸，可以在两种蛋白抽提液中加入DTT至终浓度0.5mM。

2．对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS洗一遍，用细胞刮刀收集细胞，或用EDTA消化后吹打下细胞(不用胰酶硝化，以免胰酶消化目的蛋白)。500g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清留下沉淀备用。

3．对于悬浮细胞：用PBS洗一遍，500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，留下细胞沉淀备用。

4．每20μl细胞沉淀加入200μl浆蛋白抽提试剂(2×106个细胞沉淀的体积约20μl或40mg)。

5．用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长)，必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。

6．冰浴10分钟。

7．Z高转速剧烈涡旋10秒，4℃，12000～16000g离心10分钟。

8．上清即为抽提得到的细胞浆蛋白，立即吸取上清至预冷的样品管中备用，进行后续的PAGE、Western等实验，但蛋白浓度较低，可根据需要进行相应浓缩。

9．沉淀即为细胞核，要完全吸尽残余的上清(避免细胞浆蛋白的污染)，加入50-100μl核蛋白抽提试剂。

10．用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长)至沉淀完全分散，冰浴10分钟。

11．Z高转速剧烈涡旋10秒，4℃，12000～16000g离心10分钟。

12．立即吸取上清至预冷的样品管中，此即为抽提得到的细胞核蛋白。可进行后续实验或-70℃冻存。 对于组织样品：把组织称重后，尽可能切成非常细小的碎片，按每50mg组织加入200μl～500μl PBS，用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液，500g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，收集沉淀。加入200μl浆蛋白抽提试剂后接上述步骤5。



注意事项：

1．裂解得到的蛋白样品，由于含有较高浓度的去垢剂干扰，不能用Bradford法测定蛋白浓度，可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒(货号QN1075)测定蛋白浓度。

2．对于组织样品，本试剂盒适用于新鲜组织，对冻存组织抽提效果较差。

3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。



储存条件：核/浆蛋白抽提试剂4℃保存，PMSF于-20℃保存。





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·杆菌肽

编号：QN0008

英文名称：Bacitracin

规格：1g|5g

CAS：1405-87-4

分子式：C66H102N17O16S

分子量：1421.68

别名：枯草菌素;枯草菌肽;肝菌肽;枯草杆菌肽;杆菌酞;杆菌素;枯草杆菌素



·CTAB(溴代十六烷基三甲胺)

编号：QN0245

英文名称：Cetyltrimethylammonium bromide

规格：100g|500g

本品CTAB是一种阳离子去污剂，具有从低离子强度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性，在这种条件下，蛋白质和中性多聚糖仍留在溶液里，在高离子强度的溶液里，与蛋白质和大多数酸性多聚糖以外的多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸。因此，CTAB可以用于从大量产生粘多糖的有机体如植物以及某些革兰氏阴性菌(包括E.coli的某些株)中制备纯化DNA。



别名：鲸蜡烷三甲基溴化铵

CAS号：57-09-0

分子式：C19H42NBr

分子量：364.45

储存条件：室温干燥保存

纯度：＞99%

性状：白色粉末



CTAB原理：CTAB是一种阳离子去污剂，具有从低离子强度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性，在这种条件下，蛋白质和中性多聚糖仍留在溶液里，在高离子强度的溶液里，能够与蛋白质和大多数酸性多聚糖以外的多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸，从而将核酸分离出来。

CTAB使用方法：

1.提取DNA配方：

CTAB 4g

NaCl 16.364 g

1M Tris-HCl 20 mL( PH8.0)

冷却后0.2-1%2-巯基乙醇(400ul)氯*(代"仿")-异戊醇(24：1)：先加96ml氯*(代"仿")，再加4ml异戊醇，摇匀即可。

2.提取RNA配方

2% CTAB(W/V)

2%聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V)

100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配制)

25mM EDTA

由于在高温灭菌条件下，Tris-HCl要和DEPC发生反应，所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC 处理的水

CTAB使用注意事项：CTAB有毒，半数致死量(大鼠，静脉)44mg/kg。具有刺激性，若吸入、摄入或皮肤吸收，会对人体有害。使用时要戴合适的手套和防护眼镜(或在通风橱操作)。避免吸入其粉尘。





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·5"-腺嘌呤核苷酸

编号：QN0826

英文名称：Adenosine 5"-monophosphate

规格：1g

CAS号：61-19-8



·头孢吡肟

编号：QN0031

英文名称：Cefepime

规格：100mg

此产品为第四代头孢菌素。其KJ谱有进一步扩大，对多种革兰阳性和阴性菌，包捂畅杆菌属、绿脓杆菌和其它非发酵性杆菌、嗜血杆菌属、葡萄球菌等均有较强的KJ活性。用于敏感菌所引起的各种感染，主要用于维治性感染如金葡菌、肠杆菌属及绿脓杆菌引起的呼吸道感染。生化实验研究用试剂类产品，作为抗生素用于细菌培养基配置。



CAS：88040-23-7

分子式：C19H24N6O5S2

分子量：480.56

储存条件：2～8℃

性状：无色粉末



·DiI标记氧化型低密度脂蛋白

编号：QN0287

英文名称：DiI-Ox- LDL

规格：500μg

来源：人

浓度：1.0mg/ml

储存条件：2～8℃避光保存，请勿冷冻



·BCA蛋白浓度测定试剂盒

编号：QN1075

英文名称：BCA Protein Assay Kit

规格：500微孔(50T)|500微孔(50T)*10

碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫蓝色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA, EGTA)、还原剂(DTT，巯基乙醇)和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可SYBradford蛋白浓度测定试剂盒。



操作说明：

一. 微孔酶标仪法

1. 配制工作液：根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。

2. 稀释标准品：取10μL BSA标准品用PBS稀释至100μL(样品一般可用PBS稀释)，使终浓度为0.5mg/mL。将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20μL加到96孔板的蛋白标准品孔中，加PBS补足至20μL。

3. 将样品作适当稀释(多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释)，加20μL到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

4. 各孔加入200μL BCA工作液，37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。



二. 分光光度计法 如没有酶标仪，可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。 步骤如下：

1. 配制工作液：根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。

2. 稀释标准品：取100μL BSA标准品用PBS稀释至1mL(样品一般可用PBS稀释)，使终浓度为0.5mg/mL。

3. 取八支(或者更多)5mL离心管，标上号，按下表加入试剂。

4.37℃放置15～30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值，根据标准曲线计算出蛋白浓度。



注意事项：

1. 长期不用时，Cu试剂与PBS稀释液可置于2～8℃保存，如发现细菌污染则应丢弃。BCA试剂在低温条件下出现结晶沉淀时，可37℃温育使其完全溶解, 不影响使用。

2. 样品中若含有较多干扰物质时，请采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。



储存条件：按要求储存，有效期1年

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