转基因小鼠
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随机插入转基因小鼠是将一段外源基因随机整合到小鼠基因组中,获得过量表达目的基因的小鼠模型。
I 转座子介导GX转基因(TMGI)
原理 TMGI系统通过转座子特有的“剪切和粘贴”机制,可以有效地介导外源DNA片段对基因组的整合。在转座的过程中,转座酶识别位于转座片段两端转座子特异的inverted terminal repeat sequences (ITRs),将两个ITRs及其中间的片段整合到基因组上。其强大转座功能可以GX地实现两个ITRs间目的基因的整合。相较于原核注射随机转基因小鼠而言,具有1)倾向于插入到基因组有活跃转录的位置,目的基因表达效率高;2)单拷贝插入;3)无插入片段大小限制;4)插入片段可移除的优点。将目的片段克隆至转座子质粒中,与转座酶mRNA一起注射至C57BL/6J小鼠受精卵胞质。(更多特异性或条件性过表达模型详情请点击此处)
服务周期 3-4个月II 受精卵雄原核DNA注射(完全随机整合)
原理 构建含目的片段的质粒,线性化后注射至C57BL/6J小鼠受精卵雄原核。
服务周期 3-4个月
III 慢病毒转染法
原理 构建含目的片段的慢病毒载体,包装成慢病毒,注射至C57BL/6J小鼠受精卵卵周隙,感染获得转基因小鼠。
服务周期 3-6个月