液质联用（QE）混合蛋白鉴定（HPLC-MS/MS蛋白质鉴定）

液质联用技术HPLC-MS/MS

利用LC-ESI-MS/MS蛋白鉴定技术对胶条样本（即SDS-PAGE样本）、IP、co-IP、Pull-down等纯化溶液中等复杂样本进行蛋白鉴定。

 

技术原理

HPLC-MS/MS又叫GX液相色谱-质谱联用技术，它以液相色谱作为分离技术，质谱作为检测系统。样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后经过质谱仪质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器的到质谱图，液质联用体现了色谱和质谱的优势互补，将色谱对复杂样品的高分离能力，与MS具有高选择性、高灵敏性及能够提供相对分子质量与结果信息的优点结合起来，在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域的到了广泛的应用。

 

技术路线

 

仪器类型

Thermo-Scientific Q Exactive

 

应用范围

相互作用蛋白复合体或多肽的鉴定

 

技术优势

适合复杂样品的蛋白鉴定，如相互作用洗脱的蛋白混合液、胶条等

周期短，通量高

 

样品要求

1.双向凝胶胶点：考染、银染（质谱兼容）点清晰可见

2.SDS-PAGE条带：考染、银染（质谱兼容）点清晰可见

3.蛋白质溶液：蛋白总量>5μg，浓度>0.1μg/ul，缓冲液不含去污剂SDS、NP40，Triton X-100等