小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家

 

一、ELISA试剂盒原理
 

 小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家应用双抗体夹心法测定标本中 小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入，再与HRP标记的 小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成ZZ的黄色。颜色的深浅和样品中的 小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中 小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家浓度。



二、ELISA试剂盒操作实验步骤
 

1.  小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在DY、第二孔中分别加标准品100μl，然后在DY、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从DY孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为900ng/L，600ng/L ，300ng/L，150ng/L， 75ng/L）。
2.  小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品ZZ稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.  小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.  小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.  小鼠白介素10(IL-10)ELISA人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒高灵敏度便宜厂家终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 

 

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