靶基因鉴定：luciferase报告基因表达载体的构建与检测

简介
当miRNAs与靶基因的3’ UTR结合后，主要YZmRNA的翻译，可以Western Blot检测靶蛋白的表达水平；也有部分表现为对标靶mRNA的降解，可以采用qRT-PCR进行检测。但无论那一种方法，都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测，蓝吉生物的技术人员利用Promega特有psiCHECK质粒，对miRNAs与靶基因3’UTR的关系作出准确判断。
 

 
 
服务优势：
★  采用Promega公司特有psiCHECK质粒；
★  所采用的Luciferase双萤光报告系统，可以获得宽泛的线性定量范围与极高的灵敏度；
★  采用瞬时转染技术，操作简便、快速，周期短，适用于绝大多数细胞类型。
 

服务流程：
★ PCR扩增靶基因的3’UTR，或直接合成结合位点序列（1-3次重复）；
★ 将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒；
★ 合成miRNA 模拟物；
★ 将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞；
★ 多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。