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48T/96T 武汉纯度定制人抗风疹病毒IgG抗体 ELISA试剂盒

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武汉纯度定制人抗风疹病毒IgG抗体 ELISA试剂盒


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武汉纯度定制人抗风疹病毒IgG抗体 ELISA试剂盒





武汉纯度生物科技有限公司,产主要生产销售实验室常用抗原抗体、试剂、Elisa试剂盒、免疫检测试剂盒、金标试剂盒、金标检测卡、动物血清、血浆、全血、抗血清、生物试剂、培养基、实验室仪器耗材、化学试剂、生物制品、标准品、对照品、生化免疫制品、免疫亲和柱、菌株、质粒、室内质控品、细胞、细胞因子

武汉纯度定制人抗风疹病毒IgG抗体 ELISA试剂盒


一.检测原理


试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

二.样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生里盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

三.自备物品

1.酶标仪(450nm)

2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

操作注意事项

武汉纯度定制人抗风疹病毒IgG抗体 ELISA试剂盒





1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,终结果乘以5才是样本实际浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

四.试剂盒组成

名称 96孔配置 48孔配置 备注

微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无






样本稀释液 6mL 3mL 无

检测抗体-HRP 10mL 5mL 无

20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释

底物A 6mL 3mL 无

底物B 6mL 3mL 无

终止液 6mL 3mL 无

封板膜 2张 2张 无武汉纯度定制人抗风疹病毒IgG抗体 ELISA试剂盒

说明书 1份 1份 无

自封袋 1个 1个 无




试剂盒组成



名称


96孔配置


48孔配置


备注



微孔酶标板


12孔×8条


12孔×4条





阴性对照


0.5mL


0.5mL





阳性对照


0.5mL


0.5mL





检测抗原-HRP


10mL


5mL





20×洗涤缓冲液


25mL


15mL


按说明书进行稀释



样本稀释液


6mL


3mL





底物A


6mL


3mL





底物B


6mL


3mL





终止液


6mL


3mL





封板膜


2张


2张





说明书


1份


1份





自封袋


1个


1个





注:标准品浓度都不相同,麻烦联系客服索取相应说明书

五.试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。人胆酸(CA)ELISA试剂盒

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。武汉纯度定制人抗风疹病毒IgG抗体 ELISA试剂盒

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。






六.试剂盒性能

1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

2. 灵敏度:Z低检测浓度小于(参考说明书)

3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

6. 有效期:6个月

免责声明

1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。



本品为科研试剂,只对单位实验室学校等正规用途出售。



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