用途:SNP基因分型检测、基因表达分析、芯片验证、病毒载量测定、高通量筛选。
性能: - 有两大类、9种定量PCR Mix:EvaGreen和TaqProbe荧光定量。
- 均为一管式预混液,使用方便,避免操作误差。
- 预混液中的酶是HotStart Taq酶,灵敏度高,特异性强,数据准确。
- 既适用于需要参比染料(ROX)的仪器如ABI系列,也适用于不需要参比染料的仪器如Biorad和Roche仪器。
- EvaGreen为SYBR Green I替代品,具有对PCRYZ性低、荧光信号强、稳定性强、安全性高等特点:
- 对PCRYZ性极低,干扰极小,因此可用快速PCR步骤,极大缩短PCR延伸时间,非常适合HRM分析。
- 可用较高浓度,从而获得远强于SYBR Green I扩增信号;消除“染料重分布”缺陷,兼容多重PCR,兼容PCR后的高分辨率熔解曲线(HRM)分析,被越来越多地用于PCR后基因分型和异源双链分析。
- 稳定性极强:在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。
- 安全性更高:细胞膜穿透性测试表明,几乎不穿透细胞膜,比SYBR Green I更安全。独立实验室测试结果显示,既没有诱变性,也没有细胞毒性。
Eva Green与SYBR GreenⅠ在临床实验诊断研究中的差异:结 论:RQ-PCR可以准确检测微小残留病(MRD)融合基因表达水平;Eva Green和SYBR GreenⅠ都可以用于RQ-PCR,但是Eva Green更敏感GX;监测融合基因表达可以有效观察不同ZL方法的治LX果。
结果3:SYBR Green Ⅰ和Eva Green两种染料的RQ-PCR比较:不同荧光强度染料SYBR GreenⅠ与Eva Green用于相同浓度拷贝时,扩增曲线与解离曲线的Ct值相同,但Eva Green的荧光强度强于SYBR GreenⅠ,约为SYBR GreenⅠ的4倍。
结果5:动态监测的10例初诊患者随机分为两组,分别给予ATRA +化疗或ATRA +
As2O3ZL。每2至3周抽取标本,检测患者MRD,初发时RQ-PCR和巢式PCR均为阳性,30次检测中SYBR GreenⅠ实时定量PCR相对巢式PCR检查融合基因符合率为93.133%,Eva Green PCR法的符合率为96.167%。
(摘自《实时定量聚合酶链反应在急性早幼粒细胞白血病融合基因检测中的临床应用》:中华检验医学杂志2006年5月第29卷第5期 Chin J LabMed,May 2006, Vol 29, No15)
温馨提示:不可用于临床ZL。
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