48t/96t 人抗角蛋白抗体(AKA)ELISA试剂盒分析检测

人抗角蛋白抗体(AKA)ELISA试剂盒分析检测操作步骤：



1、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。



2、温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。



3、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用



4、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此



重复5次，拍干。



5、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。



6、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色



10 分钟.



7、终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。



8、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。



人抗角蛋白抗体(AKA)ELISA试剂盒分析检测技术原理：

(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

(6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的GX催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。