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鱼类主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒说明书

产品信息
  • 产品货号:FK-KJ2218规格:96T/48T上海樊克生物科技有限公司供应:
    鱼类主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒说明书
    鱼类主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒说明书Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置 标准品稀释液:1.5ml×1瓶 酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)

    试剂盒组成:
    封板膜:2片(48)/2片(96)
    说明书:1份
    密封袋:1个
    标准品: 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
    酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存
    样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
    浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存

    目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本的含量。

    elisa试剂盒样本处理及要求:
    1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
    2 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
    3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
    4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
    5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
    6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
    7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

    操作步骤:
    1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在DY、第二孔中分别加标准品100μl,然后在DY、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从DY孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
    2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品ZZ稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
    4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
    5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
    6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
    7. 温育:操作同3。
    8. 洗涤:操作同5。
    9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
    10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
    11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    elisa试剂盒注意事项:1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
    2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
    3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
    4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔DY孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请ZH乘以总稀释倍数(×n×5)。
    5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6. 底物请避光保存。
    7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
    8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
    9. 本试剂不同批号组分不得混用。
    10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

    试剂盒性能:
    1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
    2.批内与批见应分别小于9%和11%

    检测范围:
    0.2IU/L - 6IU/L

    服务承诺:
    供货期:款到发货。
    工作时间内免费的技术咨询和指导 。
    为客户提供来样检测服务,ZD限度实验结果的有效性(免费代测)。
    保存条件及有效期:
    试剂盒保存:2-8℃| 有效期:6个月
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