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一站式 RNA 电泳套装10 次使用说明书

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一站式 RNA 电泳套装10 次使用说明书注意事项:

1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。

2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。

3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。

一站式 RNA 电泳套装10 次使用说明书操作说明:

1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。

2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。

3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。

4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。

5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。

6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。



一站式 RNA 电泳套装10 次使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:

(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。

(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。

(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。

(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。

脱脂奶粉 Ginkgo biloba CP,24.7% M84477 25克

血清消化粉 EDOT 2N,99% M84478 10克

全胃浸粉 2-Aminophenol-4-sulfonic acid 2N,200目 M84479 25克

心浸粉(牛) PTC 3.5N,200目 M84480 500克

肝浸粉(牛) Sodium hydrosulfide hydrate 3.5N,200-250目 M84481 25克

脑浸粉(牛) Calcium propionate 3.5N,250-300目 M84482 1克

蛋清粉 PMMA 3.5N M84483 1克

蛋黄粉 Triflic acid AR,99% M84484 1克

琼脂粉 Tributyl Citrate CP,99% M84485 1克

细菌琼脂粉 Acetyl tributyl citrate 2.5N,99.5% M84486 1克

猪胆粉 Disodium phenyl phosphate hydrate CP,99% M84487 25克

牛肉粉 Acridone 3N,99.9% M84488 100克

小牛浸膏粉 TCH AR,99.5% M84489 250克

牛肉浸膏 PCAD AR,99.5% M84490 25克

酵母浸出粉 TOA 5N M84491 1克

酵母浸出膏 Aluminum tert-butoxide 5N M84492 5克

三号胆盐 DPPH 4N M84493 10克

五号胆盐 2-Thiouracil 3.5N,0.25×50㎜ M84494 5克

七号胆盐 Tungsten hexachloride 3.5N,0.1㎜ M84495 25克

羊胆盐 TPTZ 3.5N,0.5㎜ M84496 100克

猪胆盐 Paclitaxel CP M84497 25克

禽胆盐 Estradiol CP,99% M84498 100克

抗体IgG   0.2ml

Anti-IMP3/FITC  荧光素标记胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3抗体IgG   0.2ml

Anti-ING1/p33/FITC  荧光素标记生长YZ因子基因1抗体IgG   0.2ml

Anti-Inhibin Alpha/FITC  荧光素标记YZ素α抗体IgG   0.2ml

Anti-Inhibin BetaA/FITC  荧光素标记YZ素βA抗体IgG   0.2ml

Anti-Inhibin Beta B /FITC  荧光素标记YZ素βB抗体IgG   0.2ml

Anti-Inhibin Beta C /FITC  荧光素标记YZ素βC抗体IgG   0.2ml

Anti-Inhibin Alpha/Biotin  生物素化YZ素α抗体IgG   0.2ml

Anti-Insulin/FITC  荧光素标记标记胰岛素抗体IgG   0.2ml

Anti-Insulin/FITC  荧光素标记胰岛素抗体IgG   0.2ml

Anti-Insulin(1-51 protein)/FITC  荧光素标记胰岛素1-51蛋白抗体IgG   0.2ml

Anti-Integrin alpha 1/CD49a/FITC  荧光素标记整合素α1抗体IgG   0.2ml

Anti-Integrin Alpha2/CD49b/FITC  荧光素标记整合素α2抗体IgG   0.2ml

Anti-Integrin Alpha2b/CD41/FITC  荧光素标记血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗体IgG   0.2ml

Anti-Integrin Alpha3/FITC  荧光素标记整合素α3抗体IgG   0.2ml

Anti-Integrin Alpha3 Beta1/FITC  荧光素标记整合素α3β1抗体IgG   0.2ml

Anti-Integrin a7/FITC  荧光素标记整合素α7抗体IgG   0.2ml

Anti-Integrin AlphaE2/CD103 /FITC  荧光素标记整合素αE2抗体IgG   0.2ml

anti-Integrin alpha E2 /FITC  荧光素标记整合素alpha E2 抗体IgG   0.2ml

Anti-Integrin AlphaM/CD11b /FITC  荧光素标记巨噬细胞表面分子/整合素-α2抗体IgG   0.2ml

一站式 RNA 电泳套装10 次使用说明书Anti-Integrin avb3/FITC  荧光素标记整合素avb3抗体IgG   0.2ml

Anti-Integrin AlphaV Beta5/FITC  荧光素标记整合素αVβ5抗体IgG   0.2ml

Anti-Integrin Beta5/FITC  荧光素标记整合素β5抗体IgG   0.2ml

Anti-IQGAP1/FITC  荧光素标记支架蛋白抗体IgG   0.2ml

Anti-Phospho-IRAK1 (Ser376) /FITC  荧光素标记磷酸化白介素-1受体相关激酶1抗体IgG   0.2ml

Anti-Phospho-IRAK1 (Thr209) /FITC  荧光素标记磷

一站式 RNA 电泳套装10 次使用说明书



(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)

(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀

(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次

(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)

(7)10,000rpm,4℃离心20min

(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀

(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)

(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上

(11)12,000rpm,4℃离心20 min

(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥

(13)加200ul的DEPC处理水溶解

(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量

(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)


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