抗大鼠IgG小鼠杂交瘤细胞；6C9

细胞名称   抗大鼠IgG小鼠杂交瘤细胞；6C9生长特性

形态特性   淋巴母细胞样

生长特性  半贴壁生长

特征特性   可产生单克隆抗体，抗原为大鼠IgG。 

培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

传代方法   保持细胞密度在1×105～1×106 cells/ml之间，每周换液2～3次

传代情况  不详

冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS 

支原体检测  阴性 

STR   -

同工酶  

染色体  

使用权限  A类

抗大鼠IgG小鼠杂交瘤细胞；6C9生长特性分类:

A类：常用的可广泛供应的细胞

B类：需经提供者同意才能对外供应的细胞

C类：安全保管，仅代为保存，不用于供应的细胞

运输保存：

采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经完全融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按指定条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

保存条件：4℃保存一年;-20℃长期保存

用途：只可用于科研。

储存：液氮。

运输：干冰(第二代培养末期液氮冻存)。

细胞一般2-3天更换一次培养基，这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。

注意：一次植入后，在6-16小时内更换培养基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中，出现任何问题（人为或者非人为），导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性，支持客户检测对应的biomarker，（如证明细胞错误，全额退款。）公司针对每株细胞，鉴定gene background，鉴定完成的细胞可以提供数据，用于证明细胞的真实性，并且帮助客户更多的了解细胞特性。

抗大鼠IgG小鼠杂交瘤细胞；6C9生长特性操作步骤：

1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。

3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。

5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。

6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。

7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。

8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。

9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。

10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。

11. 镜检观察。



抗大鼠IgG小鼠杂交瘤细胞；6C9生长特性来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品Pai），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

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