SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )20L使用说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )20L使用说明书操作说明:
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。
3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )20L使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
重组人 TSPAN1 蛋白 (aa 110-211, His 标签) Recombinant Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)
重组人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 标签) Recombinant Bone Morphogenetic Protein 7 (BMP7)
重组人 S100A4 蛋白 (His 标签) Recombinant Bone Morphogenetic Protein Receptor 1A (BMPR1A)
重组人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein Receptor 1B (BMPR1B)
重组人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 (His 标签) Recombinant Osteocalcin (OC)
重组人 KEAP1 / INRF2 蛋白 (His & GST 标签) Recombinant Osteopontin (OPN)
重组人 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 标签) Recombinant Bone Sialoprotein (BSP)
重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)
重组人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 标签) Recombinant Caspase 14 (CASP14)
重组人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 标签) Recombinant Caspase 3 (CASP3)
重组人 CD47 蛋白 (Fc 标签) Recombinant Caspase 5 (CASP5)
重组人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 (aa 1-268, 196 Met/Arg, His 标签) Recombinant Caspase 7 (CASP7)
重组人 PROC1 / Protein C / PROC 蛋白 (His 标签) Recombinant Caspase 8 (CASP8)
重组人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白 Recombinant Caspase 9 (CASP9)
Alexa Fluor 350标记的兔抗牛IgG
Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗牛IgG
Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗牛IgG
Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗牛IgG
Rabbit Anti-Bov IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗牛IgG
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )20L使用说明书Rabbit Anti-Bov IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗牛IgG
Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗牛IgG
Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗牛IgG
Rabbit Anti-Bov IgG/Gold 胶体金标记的兔抗牛IgG
Rabbit Anti-Bov IgG/RBITC 罗丹明标记的兔抗牛IgG
Rabbit Anti-Bov IgG/FITC FITC标记的兔抗牛IgG
Rabbit Anti-Bovine IgM/FITC FITC标记的兔抗牛IgM
Rabbit Anti-Bovine IgM/RBITC 罗丹明标记的兔抗牛IgM
Rabbit Anti-Bovine IgM/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗牛IgM
Rabbit Anti-Bovine IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗牛IgM
Rabbit Anti-Bovine IgM/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗牛IgM
Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗牛IgM
Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗牛IgM
Rabbit Anti-Bovine IgM/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗牛IgM
Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold 胶体金标记的兔抗牛IgM
Rabbit Anti-Bovine IgM/Bio 生物素标记的
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )20L使用说明书
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)