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环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存

产品信息

环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存产品及特点:
易错 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% ±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存变性温度与时间:
模板变性温度是决定 PCR 反应中双链 DNA 解链的温度,达不到变 性温度就不会产生单链 DNA 模板,PCR 也就不会启动。变性温度低则变性不完全, DNA 双链会很快复性,因而减少产量。变性温度太高,又会影响酶的活性。一般情况 下可设为 94 20~30 秒,高温时间应尽量缩短,以保持耐热 DNA 聚合酶的活力, zui高变性温度不宜超过 95 退火温度与时间:退火温度决定 PCR 特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物 不能与模板牢固结合.
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存DNA 扩增效率下降;
温度低产量高,但过低可造成引物与模板 错配,非特异性产物增加。合适的退火温度一般在 45~68之间。设置特定反应的zui 适退火温度,可根据引物的(G+C%含量进行推测,一般实验中退火温度比扩增引 物的熔解温度 Tm 5,退火时间一般为 30~60 秒,足以使引物与模板之间完全结 合,长时间退火没有必要。
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存详细说明书:

环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存使用方法:
1. 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR 专用 dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 补水到 30 uL
2.
按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94 3 分钟易错 PCR 94 1 分钟 45 1 分钟 循环 30 次(见注) 72 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
3-methoxy Prostaglandin F1α 1 mg     3-methoxy-9alpha。,11alpha。,15S-trihydroxy-prost-13Z-en-1-oic acid 3-methoxy PGF1α; 3-methoxy Prostaglandin F1α

Clonidine hydrochloride 500 mg     Catapres|Kapvay|ST 155 N-2,6-dichlorophenyl-4,5-dihydro-1H-imidazol-2-amine, monohydrochloride

胰蛋白胨(500GM     Tryptone Tryptic digest of casein.

Rabeprazole sodium salt 10 mg     2-[[[4-3-methoxypropoxy-3-methyl-2-pyridinyl]methyl]sulfinyl]-1H-benzimidazole monosodium salt Aciphex

Hydroxy Linoleins 500 ug     Hydroxy Linoleins

YPAC Cocktail Set 1000X     StemBoost YPAC Cocktail Set 1000X), Sterile-Filtered
MPO Hydrogen Peroxide 1 ea     MPO Hydrogen Peroxide

生物素标记单甲基化组蛋白H3K79多肽     Biotinylated Monomethyl Histone H3K79 Peptide 200 ul

3-dodecanoyl-NBD Cholesterol 500 ug     12-[7-nitno-213-benzoxadiazol-4-ylamino]-3S10R13R-3-methoxy-1013-dimethyl-17-((R-6-methylheptan-2-yl-tetradecahydro-1H-cyclopenta[α]e 3-C12-NBD Cholesterol 3-dodecanoyl-NBD Cholesterol

Wiskostatin 1 mg     3,6-dibromo-α-[dimethylaminomethyl]-9H-carbazole-9-ethanol

AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5 500 ug     5-3-2-iodobenzoyl-1H-indol-1-yl-24567-d5pentanoic acid AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5

N,N -Dicyclohexylurea (100 g)     DCU|NSC 1713, N,N -Dicyclohexylurea, N,N’-dicyclohexyl-urea
Precoated Goat Anti-Mouse IgG EIA 96-Well Strip Plate 5 ea     Precoated Goat Anti-Mouse IgG EIA 96-Well Strip Plate

Trimetxoprim 50 g     Trimpex 5-[3,4,5-trimetxoxypxenylmetxyl]-2,4-pyrimidinediamine

FluoroQuest封篇及,含DAPI     FluoroQuest Mounting Medium with DAPI

Donepezil 10 mg     23-dixy7no-56-dimetxoxy-2[[1-pxenylmetxyl-4-piperidinyl]metxyl]-1H-inden-1-one Aricept Donepezil

R-Palmitoyl-1-metxyl Ethanolamide 5 mg     N-2-xy7noxy-1R-metxyletxyl-hexadecanamide R-1 PMA R-Palmitoyl-1-metxyl Ethanolamide

N-[1-metxyl-4-piperidinylmetxyl]-3-[3-trifluorometxoxypxenyl]imidazo[12-b]pyridazin-6-amine     SGI-1776
肉汤培养基250g用于初次分离细菌的增菌培养

糖发酵基础肉汤 Bromcresol Purple Broth Base 适用于微生物检验中各种糖发酵实验,无菌加入各种糖醇类物质(SN标准)

SCHAEDLER厌氧菌琼脂 SCHAEDLER Agar 250 厌氧菌的分离培养

亚碲酸钾血琼脂基础250g/瓶用于白喉杆菌的分离培养,需添加亚碲酸钾及羊血incubationmedia亚碲酸钾血琼脂基础250g/瓶用于白喉杆菌的分离培养,需添加亚碲酸钾及羊血

EnterococcusBroth
AgarmediumH(MacConkeyagar)

Anaerobic agar acc.to BREWER 厌氧性琼脂 1.05452.0500 MERCK默克 incubation media Anaerobic agar acc.to BREWER 厌氧性琼脂 1.05452.0500 MERCK默克

EB增菌液冻干配套试剂 10 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。

戊烷脒多粘菌素B琼脂基础PentaneAmidinespolymyxinBagarbase

APTBroth
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存琼脂培养基H250g用于肠道致病菌的选择性分离培养。

A-1 Broth A-1肉汤 1.00415.0500 MERCK默克 incubation media A-1 Broth A-1肉汤 1.00415.0500 MERCK默克

李氏增菌液LB1冻干配套试剂 10 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。

十二烷基钠琼脂Sodiumlaurylsulfateagar用于鼠疫杆菌抗噬菌体培养

APT肉汤 250g 用于异质发酵乳酸杆菌和其它需高含量盐酸胺素菌的培养。

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