环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存
- 产地:上海市
- 供应商:上海莼试生物技术有限公司
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环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存变性温度与时间:
模板变性温度是决定 PCR 反应中双链 DNA 解链的温度,达不到变 性温度就不会产生单链 DNA 模板,PCR 也就不会启动。变性温度低则变性不完全, DNA 双链会很快复性,因而减少产量。变性温度太高,又会影响酶的活性。一般情况 下可设为 94℃ 20~30 秒,高温时间应尽量缩短,以保持耐热 DNA 聚合酶的活力, zui高变性温度不宜超过 95℃。 退火温度与时间:退火温度决定 PCR 特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物 不能与模板牢固结合.
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存DNA 扩增效率下降;
温度低产量高,但过低可造成引物与模板 错配,非特异性产物增加。合适的退火温度一般在 45~68℃之间。设置特定反应的zui 适退火温度,可根据引物的(G+C)%含量进行推测,一般实验中退火温度比扩增引 物的熔解温度 Tm 低 5℃,退火时间一般为 30~60 秒,足以使引物与模板之间完全结 合,长时间退火没有必要。
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存详细说明书:
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR 专用 dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
3-methoxy Prostaglandin F1α (1 mg) 3-methoxy-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prost-13Z-en-1-oic acid; 3-methoxy PGF1α; 3-methoxy Prostaglandin F1α
Clonidine (hydrochloride) (500 mg) Catapres|Kapvay|ST 155; N-(2,6-dichlorophenyl)-4,5-dihydro-1H-imidazol-2-amine, monohydrochloride
胰蛋白胨(500GM) Tryptone, Tryptic digest of casein.
Rabeprazole (sodium salt) (10 mg) 2-[[[4-(3-methoxypropoxy)-3-methyl-2-pyridinyl]methyl]sulfinyl]-1H-benzimidazole, monosodium salt; Aciphex
Hydroxy Linoleins (500 ug) Hydroxy Linoleins
YPAC Cocktail Set (1000X) StemBoost YPAC Cocktail Set (1000X), Sterile-Filtered
MPO Hydrogen Peroxide (1 ea) MPO Hydrogen Peroxide
生物素标记单甲基化组蛋白H3K79多肽 Biotinylated Monomethyl Histone H3K79 Peptide (200 ul)
3-dodecanoyl-NBD Cholesterol (500 ug) 12-[(7-nitno-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)amino]-(3S,10R,13R)-3-methoxy-10,13-dimethyl-17-((R)-6-methylheptan-2-yl)-tetradecahydro-1H-cyclopenta[α]e; 3-C12-NBD Cholesterol; 3-dodecanoyl-NBD Cholesterol
Wiskostatin (1 mg) 3,6-dibromo-α-[(dimethylamino)methyl]-9H-carbazole-9-ethanol
AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5 (500 ug) 5-(3-(2-iodobenzoyl)-1H-indol-1-yl-2,4,5,6,7-d5)pentanoic acid; AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5
N,N -Dicyclohexylurea (100 g) DCU|NSC 1713, N,N -Dicyclohexylurea, N,N’-dicyclohexyl-urea
Precoated (Goat Anti-Mouse IgG) EIA 96-Well Strip Plate (5 ea) Precoated (Goat Anti-Mouse IgG) EIA 96-Well Strip Plate
Trimetxoprim (50 g) Trimpex; 5-[(3,4,5-trimetxoxypxenyl)metxyl]-2,4-pyrimidinediamine
FluoroQuest封篇及,含DAPI FluoroQuest Mounting Medium with DAPI
Donepezil (10 mg) 2,3-dixy7no-5,6-dimetxoxy-2[[1-(pxenylmetxyl)-4-piperidinyl]metxyl]-1H-inden-1-one; Aricept ; Donepezil
R-Palmitoyl-(1-metxyl) Ethanolamide (5 mg) N-(2-xy7noxy-1R-metxyletxyl)-hexadecanamide; R-1 PMA; R-Palmitoyl-(1-metxyl) Ethanolamide
N-[(1-metxyl-4-piperidinyl)metxyl]-3-[3-(trifluorometxoxy)pxenyl]imidazo[1,2-b]pyridazin-6-amine SGI-1776
肉汤培养基250g用于初次分离细菌的增菌培养
糖发酵基础肉汤 Bromcresol Purple Broth Base 适用于微生物检验中各种糖发酵实验,无菌加入各种糖醇类物质(SN标准)
SCHAEDLER厌氧菌琼脂 SCHAEDLER Agar 250克 厌氧菌的分离培养
亚碲酸钾血琼脂基础250g/瓶用于白喉杆菌的分离培养,需添加亚碲酸钾及羊血incubationmedia亚碲酸钾血琼脂基础250g/瓶用于白喉杆菌的分离培养,需添加亚碲酸钾及羊血
EnterococcusBroth
AgarmediumH(MacConkeyagar)
Anaerobic agar acc.to BREWER 厌氧性琼脂 1.05452.0500 MERCK默克 incubation media Anaerobic agar acc.to BREWER 厌氧性琼脂 1.05452.0500 MERCK默克
EB增菌液冻干配套试剂 10支 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。
戊烷脒多粘菌素B琼脂基础PentaneAmidinespolymyxinBagarbase
APTBroth
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次保存琼脂培养基H250g用于肠道致病菌的选择性分离培养。
A-1 Broth A-1肉汤 1.00415.0500 MERCK默克 incubation media A-1 Broth A-1肉汤 1.00415.0500 MERCK默克
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 10支 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。
十二烷基钠琼脂Sodiumlaurylsulfateagar用于鼠疫杆菌抗噬菌体培养
APT肉汤 250g 用于异质发酵乳酸杆菌和其它需高含量盐酸胺素菌的培养。