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两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次保存

产品信息

两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次保存使用方法:
1. 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR 专用 dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 补水到 30 uL
2.
按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94 3 分钟易错 PCR 94 1 分钟 45 1 分钟 循环 30 次(见注) 72 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次保存产品及特点:
易错 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% ±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次保存DNA 扩增效率下降;
温度低产量高,但过低可造成引物与模板 错配,非特异性产物增加。合适的退火温度一般在 45~68之间。设置特定反应的zui 适退火温度,可根据引物的(G+C%含量进行推测,一般实验中退火温度比扩增引 物的熔解温度 Tm 5,退火时间一般为 30~60 秒,足以使引物与模板之间完全结 合,长时间退火没有必要。
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次保存详细说明书:

Prostaglandin F1α 1 mg     9alpha。,11alpha。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid PGF1α; Prostaglandin F1α

SMAD3 Inhibitor, SIS3 500 ug     1-3,4-dihydro-6,7-dimethoxy-21H-isoinoneolinyl-3-1-methyl-2-phenyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl-2-propen-1-one

特美汀(5GM     Timentin 15:1 Ticarcillin Disodium Salt / potewwium Clavulanate Mixture

Vardenafil hydrochloride hydrate 100 mg     2-[2-ethoxy-5-[4-ethyl-1-piperazinylsulfonyl]phenyl]-5-methyl-7-propyl-imidazo[51-f][124]triazin-41H-one monohydrochloride trihydrate Vardenafil hydrochloride hydrate

8-hydroxy Guanosine 1 mg     8-hydroxy-guanosine 8-hydroxy Guanosine

JAK/STAT Signaling Inhibitor Panel PathwayReady     PathwayReady JAK/STAT Signaling Inhibitor Panel
Methyltransferase Assay AdoHcy Positive Control 1 ea     MT Assay AdoHcy Positive Control Methyltransferase Assay AdoHcy Positive Control

生物素标记磷酸化组蛋白H3S10多肽     Biotinylated Phospho Histone Ser 10 Peptide 100 ul

N-3-oxo-tetradec-7Z-enoyl-L-Homoserine lactone 1 mg     3-oxo-N-[3S-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-7-tetradecenamide 3-oxo-C14:1-Δ7cis-L-HSL N-3-oxo-tetradec-7Z-enoyl-L-Homoserine lactone

Ac-VDVAD-AFC 10 mg     Caspase-2 Substrate Fluorogenic|N-Acetyl-Val-Asp-Val-Ala-Asp-7-amido-4-Trifluoromethylcoumarin N-

JWH 203 N-5-hydroxypentyl metabolite-d5 100 ug     2-2-chlorophenyl-1-1-5-hydroxypentyl-1H-indol-3-ylethan-1-one-24567-d5 JWH 203 N-5-hydroxypentyl metabolite-d5

17-phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amide (5 mg)     .,15S-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide 17-phenyl trinor PGF2α ethyl amide|15(S)-Bimatoprost|Bimatoprost 17-phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amide
Mouse Monoclonal Anti-Rabbit IgG 500 dtn     Mouse Monoclonal Anti-Rabbit IgG

MTSSL 50 mg     2,5-dixy7no-2,2,5,5-tetrametxyl-3-[[metxylsulfonylthio]metxyl]-1H-pyrrol-1-yloxy

Z-IETD-ProRed 620     Z-IETD-ProRed 620

Ketorolac 1 g     5-benzoyl-23-dixy7no-1H-pyrrolizine-1-carboxylic acid Acular LS |Acular PF |RS 37619|Sprix Ketorolac

Heptadecanoyl Ethanolamide 100 mg     N-2-xy7noxyetxyl-heptadecanamide Heptadecanoyl Ethanolamide

2E-3-6-Bromo-2-pyridinyl-2-cyano-N-[1S-1-pxenylethy]-2-propenamide     EZSolution WP1066
PALCAM琼脂250g用于单增李氏菌选择性分离(FDA标准)

四环素检定琼脂 Tetracyline Examination Agar 用于四环素残留的微生物学检定(SN标准)

聚山梨酯80培养基(真菌) Tween80 Medium(Fungi) 250 油剂的真菌无菌试验

MiddleBrook7H基础250g/瓶用于分枝杆菌的分离培养,每90ml培养基中添加0.5ml甘油和2ncubationmediaMiddleBrook7H基础250g/瓶用于分枝杆菌的分离培养,每90ml培养基中添加0.5
AeromonasMediumBase(Ryan)

50161 BR 10 incubation media 50161 BR 10

粉红寄生菌 模式菌株。抗原特性:Type 3。质量控制菌株 /

我妻氏血琼脂平板(9cm)用于神奈川现象试验

麦芽浸膏琼脂 200g 用于霉菌和酵母菌的分离培养和计数
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次保存Salicin

Agar for fungi acc.to KIMMIG( base) modified 真菌改性琼脂(氯化) 1.05414.0500 MERCK默克 incubation media Agar for fungi acc.to KIMMIG( base) modified 真菌改性琼脂(氯化) 1.05414.0500 MERCK默克

山梨醇麦康凯琼脂基础(SMAC) 250g 用于致病性大肠杆菌(包括O157H7)的分离培养(SN/T0973-2000SN/T 1827-2006

两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次保存变性温度与时间:
模板变性温度是决定 PCR 反应中双链 DNA 解链的温度,达不到变 性温度就不会产生单链 DNA 模板,PCR 也就不会启动。变性温度低则变性不完全, DNA 双链会很快复性,因而减少产量。变性温度太高,又会影响酶的活性。一般情况 下可设为 94 20~30 秒,高温时间应尽量缩短,以保持耐热 DNA 聚合酶的活力, zui高变性温度不宜超过 95 退火温度与时间:退火温度决定 PCR 特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物 不能与模板牢固结合

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