酵母膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)50T售后服务
- 产地:上海市
- 供应商:上海莼试生物技术有限公司
- 供应商报价:面议
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酵母膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)50T售后服务实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )推荐按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会完全丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
酵母膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)50T售后服务注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,zui短可在上机前5分钟再加入PI染色。
NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD)
大鼠肺大静脉内皮细胞完全培养基 100mL
CLEC10A Others Human 人 CLEC10A / MGL1 / CD301 人细胞裂解液 (阳性对照)
TOV21G人卵巢癌细胞 Human ovarian cancer cell line TOV21G 1640+10FBS%
小气道上皮细胞培养基SAEpiCM
MX-1(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 腮腺细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
人海马趾星形胶质细胞cDNAHA-h cDNA
CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠黑色素瘤细胞;B16-F1
Hep3B2.1-7细胞,人肝癌细胞 人髓母细胞瘤细胞,D341Med细胞 ZG仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纤维 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 间充质干细胞软骨分化培养基无诱导剂(即用型) 100ml
HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人星形胶质细胞总RNAHA tRNA
黑化大家鼠肺成纤维细胞;NRm
CRL细胞,人癌细胞 人舌癌细胞,Tca-8113细胞 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5
IMR-32(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮细胞生长培养基(即用型) 500ml
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HumanMatrixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISA试剂盒人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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