细胞蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T售后服务

细胞蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T售后服务使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
细胞蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T售后服务操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
细胞蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T售后服务实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时，注意必须彻底清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化收集后（注：胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA1 Protein Human 重组人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His & Fc 标签)

人视网膜muller细胞完全培养基 100mL

IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人细胞裂解液 (阳性对照)

GH3细胞，大鼠埀体瘤细胞 5637(人膀胱癌细胞) 非洲绿猴肾细胞;Vero E6

细胞培养超纯水CCGW

HCCLM3(人高转移肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 肝窦内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
脐带单核细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠淋巴瘤细胞;P388D1(IL-1)

H9c2细胞，大鼠心肌细胞 人肝癌细胞,HepG2/2-15细胞 CL-0128JeKo-1(人套细胞淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2

二氢叶酸还原酶缺陷型ZG仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-

CD38 Others Human 人 CD38 人细胞裂解液 (阳性对照)
CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照)

人心肌细胞-心房总RNAHCF-aa tRNA

人大隐静脉内皮细胞完全培养基 100mL

Ana-1细胞，小鼠巨噬细胞 WEHI 22.1(B淋巴细胞) 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH2

CSF3R Protein Human 重组人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 标签)

TM3(小鼠间质细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]
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