Earle's平衡盐溶液（1×EBSS,含钙镁糖酚红）500ml使用说明书

Earle's平衡盐溶液(1×EBSS,含钙镁糖酚红)500ml使用说明书使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
Earle's平衡盐溶液(1×EBSS,含钙镁糖酚红)500ml使用说明书操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
Earle's平衡盐溶液(1×EBSS,含钙镁糖酚红)500ml使用说明书实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时，注意必须彻底清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化收集后（注：胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
SC-1(小鼠胚胎细胞) 5×106cells/瓶×2

胎儿间质干细胞 Fetal bone marrow mesenchymal stem cells

CD164 Others Rat 大鼠 CD164 / Endolyn 人细胞裂解液 (阳性对照)

SHG-44细胞，神经胶质瘤细胞 霉 人淋巴内皮细胞RNAHLEC miRNA5 μg

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;MuM-2B

HCC1937(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌细胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴肾细胞;LLC-MK2
ZG仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2

ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

滑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

人间充质干细胞(hMSCs) 人肝癌细胞，Hep G2细胞 C127(细胞)

人癌细胞;MDA-MB-157

BMPR1A Others Mouse 小鼠 ALK-3 / BMPR1A 人细胞裂解液 (阳性对照)
MFAP5 Others Human 人 MFAP5 / MAGP2 人细胞裂解液 (阳性对照)

人脐动脉平滑肌细胞总RNAHUASMC tRNA

人腹膜毛细血管内皮细胞完全培养基 100mL

PA317细胞，逆转录病毒包装的NIH3T3细胞 A10(大鼠主动脉血管平滑肌细胞) 小鼠瘤细胞;Sp2/0-Ag14

CSF2 Protein Human 重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 标签)

TE-1(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠原B细胞株;BaF3
小鼠α-骨胶原交联(αCTx)ELISA试剂盒 ，英文名： αCTx ELISA Kit

人铁蛋白(FE)ELISA检测试剂盒Humanferritin,FEELISAKit 96T/48T

大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫试剂盒 Rat Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit

英文名称RatCXCL2/MIP-2ELISAKit大鼠CXCL2/MIP-2规格：96T/48T

考马斯亮蓝细胞繁殖与毒性定量检测试剂盒500次

ELISAKitGKRP人葡萄糖激酶调节蛋白规格：48T/96T
兔子白介素2(IL-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 人血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒

HumanSolubleClusterofdifferentiation38,sCD38ELISAKit 人可溶性白细胞分化抗原38(sCD38)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanEstrogen-inducedproteinpS2ELISA试剂盒人雌激素诱导蛋白PS2ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织SYK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

HumanOrexinB,OX-BELISAKit人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Earle's平衡盐溶液(1×EBSS,含钙镁糖酚红)500ml使用说明书人TH糖蛋白(THP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人TATA盒结合蛋白/TBP相关因子(TAF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人S蛋白100P（S-100P）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装