孔雀石绿水溶液（1%）100ml使用说明书

孔雀石绿水溶液(1%)100ml使用说明书使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
孔雀石绿水溶液(1%)100ml使用说明书操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
孔雀石绿水溶液(1%)100ml使用说明书实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时，注意必须彻底清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化收集后（注：胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
THP-1(人髓系白血病单核细胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠单核巨噬细胞;J774A.1

CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人细胞裂解液 (阳性对照)

973细胞，人肺癌细胞 小鼠成骨细胞系,MC3T3-E1细胞 CL-0138Lec1(仓鼠卵巢细胞)5×106cells/瓶×2

尿道上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

NHDF-c adult 正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)来自成年捐献者 500,000cells 成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
CM-M040小鼠肝窦内皮细胞完全培养基100mL

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)

卵巢上皮细胞培养基OEpiCM

MRC-5细胞，人正常胚肺成纤维细胞 人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移),KP-N-NS细胞 人脉络丛成纤维细胞HCPF

猪细胞;ST

PDCD1LG2 Others Human 人 PD-L2 / B7-DC / CD273 人细胞裂解液 (阳性对照)
TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人细胞裂解液 (阳性对照)

人滑膜细胞cDNAHS cDNA

人内脏脂肪细胞完全培养基 100mL

RLE-6TN细胞，大鼠肺上皮Ⅱ型细胞 PC-3(人前列腺癌细胞) 大鼠肝细胞;BRL 3A

EFNB2 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 标签)

16HBE(人支气管上皮样细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH3
大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人纤维母细胞生长因子受体1癌基因伴侣(FGFR1OP)免疫试剂盒 Human FGFR1 oncogene partner,FGFR1OP ELISA kit

蛋白质羰基测试盒 紫外分光光度法 50管/24样

Ratmyeloperoxidase,MPOELISA试剂盒大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒规格：96T/48T

humanhepatitisEvirusIgG,HEV-IgGELISA试剂盒人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Humanlupusanticoagulant,LAC/LAELISAKit人狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒

HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISAKit 人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanc-junELISA试剂盒人c-junELISA试剂盒规格：96T/48T

组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1(LYSINESPECIFICDEMETHYLASE-1;LSD-1)活性荧光定量检测试剂盒

HumanRotavirus，RVIgMELISAKit人轮状病毒(RV)IgMELISA试剂盒规格：96T/48T
孔雀石绿水溶液(1%)100ml使用说明书人羟脯酸(Hyp)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人潜伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人前胰淀粉样蛋白（proIAPP）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装