核仁组成区嗜银蛋白染色试剂盒(AgNOR Stain)2×50ml售后服务
- 产地:上海市
- 供应商:上海莼试生物技术有限公司
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核仁组成区嗜银蛋白染色试剂盒(AgNOR Stain)2×50ml售后服务实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )推荐按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会完全丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
核仁组成区嗜银蛋白染色试剂盒(AgNOR Stain)2×50ml售后服务注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,zui短可在上机前5分钟再加入PI染色。
RWPE1(人前列腺上皮细胞) 5×106cells/瓶×2
盘羊皮肤细胞;ASHS3
CTRL Others Human 人 CTRL-1 / CTRL / Chymotrypsin-like protease 人细胞裂解液 (阳性对照)
PG细胞,人肺巨细胞癌 小鼠巨噬细胞,Ana-1细胞 CM-R119大鼠晶状体上皮细胞完全培养基100mL
人牙龈成纤维细胞HGF
Gibco E071000 MesenPRO RS? Medium 含2%血清(New Zealand origin) 1 kit
肝内胆管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77
豚鼠胚胎细胞;104C1 貂肺上皮细胞,Mv.1.Lu细胞 GT1-1细胞,小鼠垂体瘤细胞
人肝细胞;QSG-7701 [QSG7701]
ALCAM Others Human 人 ALCAM / CD166 人细胞裂解液 (阳性对照)
APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人细胞;Hela
CL-0421RAG(小鼠肾腺癌细胞)5×106cells/瓶×2
人羊膜上皮细胞 双位点HC-KIT受体细胞株,DMF7细胞 BLO-11(小鼠骨骼成纤维细胞)
人腺泡上皮癌;HPAC
IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样
Ratmatrixmetalloproteinase7,MMP-7ELISA试剂盒大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanHemolyticcomplement,HcELISA试剂盒人溶血补体(Hc)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠八聚体结合转录因子4(OCT4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat epinephrine (EPI) ELISA Kit 大鼠肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒
Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISAKit 人骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humancatecholamine,CAELISA试剂盒人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
转基因油菜(canola)HCN92品系基因检测试剂盒20次
humansimilartoRIKENcDNA2610307008geneELISAKit人类似RIKENcDNA2610307008基因ELISA试剂盒规格:96T/48T
核仁组成区嗜银蛋白染色试剂盒(AgNOR Stain)2×50ml售后服务人碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人炭疽(Anthrax)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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