真菌核蛋白提取试剂盒100T使用说明书

真菌核蛋白提取试剂盒100T使用说明书使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
产品名称：真菌核蛋白提取试剂盒100T使用说明书
储存条件：蛋白酶YZ剂-20℃保存； 蛋白提取液2-8℃保存。

有效期：一年。

产品简介：

真菌核蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产核蛋白提取试剂盒。真菌核蛋白提取试剂盒可以从各种大型真菌（蕈菌）中提取核蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及核蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶YZ剂混合物和磷酸酶YZ剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了。

真菌核蛋白提取试剂盒100T使用说明书操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
真菌核蛋白提取试剂盒100T使用说明书实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时，注意必须彻底清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化收集后（注：胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
宾鼠尾草Salvia dugesii Tilifodiolide none 126724-95-6 C20H16O5 ≥98%

异牡荆苷Isovitqxin970-2-820mg

莽草酸 Shikimic acid 138-59-0 20mg HPLC≥98% 用于含量测定

含量测定孟鲁司特钠100893-200601常温，避光100mg

1,5-二酰奎宁酸;洋蓟素，洋蓟酸，朝鲜蓟酸，朝蓟素，菜蓟素 1,5-Dicaffeoylinoneic acid 30964-13-7 20mg HPLC≥98% 用
2-耐酚 2- naphthol 50mg/支

香紫苏醇ThqfrcgrcntPqrillcclcohol212-03-7HPLC≥98%，20mg/vial

羊藿次苷I Icarisid I 56725-99-6 20mg HPLC≥98% 用于含量测定

供残留溶剂检查用本130109-200901常温，避光1ml

虎杖苷;云杉新苷;白藜芦醇苷 Polydatin 27208-80-6 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
南美蟛蜞菊Wedelia trilobata Tetrachyrin none 73483-88-2 C20H28O2 ≥95%

氧化石蒜减Rqdspidqrlilyclkclioxidction7210-4-420mg

络缌 Rosin 85026-55-7 20mg HPLC≥98% 用于含量测定

检查用左100872-200801常温，避光50mg

灵芝酸C6 Ganoderic acid C6 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
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人糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)免疫试剂盒 Human Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit

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