洋葱伯克霍尔德氏菌说明书

洋葱伯克霍尔德氏菌说明书【标准操作流程】

菌株复苏：（按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏）

1) 所有菌株，显色培养基分4区，每区一株，标明菌株号、菌种名常用缩写如下：

cal: 白念珠菌 cgl：光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌，其他菌种标记全名

2) 隐球菌除传显色培养基以外，另传 

中文名称 洋葱伯克霍尔德氏菌说明书 

属名 Burkholderia

种名加词 cepacia

收藏时间 

原始编号 ATCC10044

模式菌株 非模式菌株

主要用途 a:2:{i:0;s:4:分类;i:1;s:4:研究;}

特征特性 

具体用途 油污处理

生物危害程度 四类



洋葱伯克霍尔德氏菌说明书实验内容：

1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 

2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 

3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4.过滤CJ：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 

洋葱伯克霍尔德氏菌说明书【标准操作流程】

菌株复苏：（按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏）

1) 所有菌株，显色培养基分4区，每区一株，标明菌株号、菌种名常用缩写如下：

cal: 白念珠菌 cgl：光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌，其他菌种标记全名

2) 隐球菌除传显色培养基以外，另传1/2块血平皿上述菌株统一37oC孵育48h

洋葱伯克霍尔德氏菌说明书菌株操作：

1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。

2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长

4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。

5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。

人前列腺细胞英文名称：22RV1

TTC卵磷脂吐温80营养琼脂/三苯四唑卵磷脂吐温80营养琼脂/三苯四氮卵磷脂吐温80营养琼脂/红四氮唑卵磷脂吐温80营养琼脂/三苯基四氮唑卵磷脂吐温80营养琼脂/TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar用于妆品中细菌总数测定250克国产/进口

人肺腺细胞英文名称：NCI-H1975

缓冲李氏菌增菌肉汤基础/Buffered Listeria Enrichment Broth李氏菌的增菌培养250克国产/进口

弹性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL

牛津琼脂基础/OXA基础/Oxford Agar base单增李氏菌的选择性分离250克国产/进口

大鼠肺大静脉平滑肌细胞完全培养基100mL

现隐肉汤/Presence Absence Broth水中大肠菌群计数250克国产/进口

SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2

PA-1(人卵巢腺细胞)5×106cells/瓶×2gersionGR GSSG （1 ea） GR GSSG

Arachidonoyl Serotonin （50 mg） N-[2-（5-hydroxy-1H-indol-3-yl）ethyl]-5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenamide； AA-5HT； Arachidonoyl Serotonin

Ciglitazone （10 mg） 5-[[4-[（1-methylcyclohexyl）methoxy]henyl]methyl]-2，4-thiazolidinedione； ADD 3878|U-63287； Ciglitazone

L-NNA （10 g） N5-[imino（nitroamino）methyl]-L-ornithine； L-NG-Nitroarginine|NG-nitro-L-Arginine； L-NNA

L-Seiaterin （1 mg） 2-amino-7，8-dihydro-6-（2S-hydroxy-1-oxoroyl）-4（1H）-teridinone； L-Seiaterin

Linolein Hydroeroxides （5 mg） Linolein Hydroeroxides

洋葱伯克霍尔德氏菌说明书13，14-dihydro-15（R，S）-hydroxy-16，16-difluoro rostaglandin E1-d4 （100 ug） 9-oxo-11α，15R，S-dihydroxy-16，16-difluoro-rostan-1-oic-3，3，4，4-d4 acid； 15-hydroxy Lubirostone； 13，14-dihydro-15（R，S）-hydroxy-16，16-difluoro rostaglandin E1-d4

Colchicine （500 mg） N-[（7S）-5，6，7，9-tetrahydro-1，2，3，10-tetramethoxy-9-oxobenzo[a]hetalen-7-yl]-acetamide； Colchicine

Arachidonic Acid （100 mg） 5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid； AA； Arachidonic Acid

JWH 081 3-methoxynahthyl isomer （5 mg） （3-methoxynahthalen-1-yl）（1-entyl-1H-indol-3-yl）methanone； JWH 081 3-methoxynahthyl isomer

Meconin （10 mg） 6，7-dimethoxy-1（3H）-isobenzofuranone； NSC 35547|Oianyl； Meconin

R-2 Methanandamide （25 mg） N-（2R-hydroxyroyl）-5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenamide； （R）-（-）-Arachidonyl-2’-Hydroxy-1’-roylamide； R-2 Methanandamide

洋葱伯克霍尔德氏菌说明书保藏方法：

1. 传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6℃冰箱内保存。

2. 液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3. 载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5. 冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。