扩展青霉（苹果青霉病菌）说明书

扩展青霉（苹果青霉病菌）说明书【标准操作流程】

菌株复苏：（按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏）

1) 所有菌株，显色培养基分4区，每区一株，标明菌株号、菌种名常用缩写如下：

cal: 白念珠菌 cgl：光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌，其他菌种标记全名

2) 隐球菌除传显色培养基以外，另传 

中文名称 扩展青霉（苹果青霉病菌）说明书 

属名 Penicillium

种名加词 expansum

收藏时间 2007-2-28

原始编号 ATCC36188

模式菌株 非模式菌株

主要用途 a:2:{i:0;s:4:研究;i:1;s:4:生产;}

特征特性 <已复核>此病主要发生在贮藏运输期间，病菌经伤口侵入致病，也可由果柄和萼凹处侵入，很少经果实皮孔侵入。气温25℃左右，病害发展快；0℃时孢子虽不能萌发，但侵入的菌丝能缓慢生长，果腐继续扩展；靠近烂果的果实，如表面有刺伤，烂果上的菌丝会直接侵入健果而引起腐烂。分生孢子萌发温限3～30℃，适温15℃；相对湿度大于90%不能萌发，适pH4。菌丝生长温度范围13～30℃，适温20℃。该病用塑料袋袋装贮藏发病多。 菌落粒状，粉层较薄，灰绿色，背面无色，白色边线宽2～2.5mm，灰白色，帚状枝不对称。分生孢子梗直立，具分隔，顶端l～2次分枝，小梗细长，瓶状；梗顶念珠状串生分生孢子，无色，单胞，圆形或扁圆形，作念珠状串生，大小3.0～3.5μm×3.5～4.2μm。分生孢子集结时呈青绿色。

具体用途 教学科研

生物危害程度 四类



扩展青霉（苹果青霉病菌）说明书实验内容：

1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 

2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 

3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4.过滤CJ：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 

扩展青霉（苹果青霉病菌）说明书【标准操作流程】

菌株复苏：（按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏）

1) 所有菌株，显色培养基分4区，每区一株，标明菌株号、菌种名常用缩写如下：

cal: 白念珠菌 cgl：光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌，其他菌种标记全名

2) 隐球菌除传显色培养基以外，另传1/2块血平皿上述菌株统一37oC孵育48h

扩展青霉（苹果青霉病菌）说明书菌株操作：

1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。

2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长

4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。

5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。

人羊膜间充质基质细胞

GN增菌液/格蓝氏阴性杆菌增菌液/Gram Negative Enrichment Broth用于沙门氏菌和志贺菌的增菌培养250克国产/进口

人胚胎肺成纤维细胞(女)英文名称：HEL2

XM-G琼脂培养基/XM-G Agar300克日本Nissui原装

人非小细胞肺腺细胞英文名称：NCI-H157

酵母蛋白胨培养基1万毫升/袋国产/进口

大鼠胰岛素细胞英文名称：INS-1

葡萄糖酪胨琼脂/Dextrose Casein Peptone Agar食品中蜡样芽孢杆菌鉴定和计数250克国产/进口

大鼠Ⅱ型肺泡上细胞完全培养基100mL

血液增菌培养基/Blood Enrichment Medium用于血液中致病菌的增菌培养250克国产/进口YM-53601 (10 mg) YM-53601, 2-[(2E)-2-(1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-ylidene)-2-fluoroethoxy]-9H-carbazole, monohydrochloride

S-(2-aminoethyl) Isothiourea (dihydrobromide) (500 mg) Antiradon|NSC 22877, S-(2-aminoethyl) Isothiourea, 2-aminoethyl carbamimidothioate, dihydrobromide

五水硫铜（500GM） Curic Sulfate， 5H2O， CAS# 7758-99-8； ≥98%

烟酰胺（维生素，维生素B3）（500GM） Niacinamide， CAS# 98-92-0； MW 122.12； US

酵母提取物溶液（100ML） Yeast Extract Solution， 25% yeast extract solution. Sterile filtered.

5（6）-FAM [5-（and-6）-羧基] 可标签肽和寡核苷 5（6）-FAM [5-（and-6）-Carboxyfluorescein] Validated for labeling etides and oligos

扩展青霉（苹果青霉病菌）说明书DABCYL  超级 DABCYL acid [4-（（4-（Dimethylamino）henyl）azo）benzoic acid] Ultraure grade

5-FITC标记的Lys赖氨 FMOC-Lys（5-FITC）-OH

10mM DAI水溶液 DAI [4，6-Diamidino-2-henylindole， dihydrochloride] 10 mM solution in water

神经元示踪染料RH 414 RH 414 [N-（3-Triethylammoniumroyl）-4-（4-（4-（diethylamino）henyl）butadienyl）yridinium dibromide]

Tide Quencher 3WS琥珀酰SE [TQ3WS SE] Tide Quencher 3WS succinimidyl ester [TQ3WS SE]

iFluor 350 酰肼 iFluor 350 hydrazide

溶酶体绿色荧光染料LysoBrite Green LysoBrite Green

StrandBrite 绿色RNA定量试剂 200X DMSO 溶液 StrandBrite Green RNA Quantifying Reagent 200X DMSO Solution

cis-2-Decenoic Acid （10 mg） 2Z-decenoic acid； cis-2-Decenoic Acid

扩展青霉（苹果青霉病菌）说明书保藏方法：

1. 传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6℃冰箱内保存。

2. 液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3. 载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5. 冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。