兔皮质酮;肾上腺酮ELISA检测试剂盒实验室专用

兔皮质酮;肾上腺酮ELISA检测试剂盒实验室专用

试剂盒名称	兔皮质酮;肾上腺酮ELISA检测试剂盒
规格	48T/96T
品Pai	RENJIEBIO
检测方法	ELISA酶联免疫法
检测波长	450nm
样本	血清、血浆、细胞上清液等
样本体积	50~100ul
研究领域	神经生物学、新陈代谢、免疫学等
使用范围	仅用于科研实验
保存	2~8℃，避光保存

兔皮质酮;肾上腺酮ELISA检测试剂盒实验室专用优势特点：

1．准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2．灵敏度：Z低检测浓度小于10 pg/ml。

3．特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4．重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

兔皮质酮;肾上腺酮ELISA检测试剂盒实验室专用操作流程如下：

（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。　

（2）酶标板置4℃，包被过夜。

（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。　

（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。　

（6）洗板，同（4）。　

（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。　

（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。　

（9）洗板，同（4）。　

（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。　

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。　

（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

兔皮质酮;肾上腺酮ELISA检测试剂盒实验室专用实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。

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