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48T/96t B细胞κ轻肽基因增强子核因子YZ因子ε 试剂盒

产品信息
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中文名:B细胞κ轻肽基因增强子核因子YZ因子ε(NFKBIE)ELISA试剂盒

规格:48t/96t

保存:2~8℃

有效期:6个月

样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。

用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

运输方式:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。

检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。








B细胞κ轻肽基因增强子核因子YZ因子ε 试剂盒 技术原理:

(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。

(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。

(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

(6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的GX催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。









注意事项:

1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。





B细胞κ轻肽基因增强子核因子YZ因子ε 试剂盒 操作流程:

(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。

(2)酶标板置4℃,包被过夜。

(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。

(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。

(6)洗板,同(4)。

(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。

(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。

(9)洗板,同(4)。

(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。

(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。

(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,Z终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。











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