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SY0755 DAB显色试剂盒棕黄色(WB)

产品信息

特别提示:包括DAB显色试剂盒棕黄色(WB)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!




产品名称:DAB显色试剂盒棕黄色(WB)

英文名称:DAB Peroxidase Substrate Kit for Western Blot (Brown-Yellow Color)

产品货号:SY0755

产品规格:1KIT



本试剂盒采用液体性滴瓶包装,使用方便,并且减少了接触有潜在毒性的DAB。DAB 即二氨基联苯胺(3,3’-diaminobenzidine),辣根过氧化物酶(Peroxidase)zuì常用的生色底物,显色呈鲜艳的棕黄色,可用于免疫组化及各种印迹显色法。



产品组份:

DAB浓缩液(40×)————3ml

H2O2 浓缩液(40×)————3ml

TBS浓缩缓冲液(40×)————3ml



操作方法

1)DAB 显色:配制完整的DAB 显色工作液,按每2 ml 蒸馏水加显色剂A,B,C 各1滴,混匀。

2)混匀后加至膜上。

3)室温显色。一般显色1-30min。若无背景出现则可继续显色。显色后用蒸馏水洗涤以终止反应。

4)观察,照相。



储存条件:-20℃,有效期一年。



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名称:4%多聚甲醛溶液(含DEPC)

货号:ZN1869

规格:500ml

产品用途:组织细胞的固定

使用方法:将组织置于4%多聚甲醛 4℃固定,固定时间与组织厚度成正比,约1mm/小时,固定液的量约为组织体积的20倍以上。

描述:DEPC是内源性RNA酶YZ剂,它可以YZ组织离体时内源性RNA 酶的活性,以防止其对RNA的降解。添加有DEP的多聚甲醛固定液固定的组织既可以用来做免疫组化,也可以用来做原位杂交,不添加的一般只能用于免疫组化。

附加说明:

含DEPC,推荐用于原位杂交等需检测核酸的实验,也可用于免疫组化,细胞凋亡(Tunel)等实验;

为了您的健康,请带口罩手套,在通风橱内操作。



名称:EDTA脱钙液

货号:ZN1870

规格:500ml

保存条件:4℃保存 ,一年有效,避免阳光直射。

产品简介:

在病理实验制作切片时,我们会经常碰到一些含钙组织,而且钙十分坚硬。由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同,含钙的组织一般不能直接制作切片。骨组织含钙量zuì多。除了骨组织之外其它组织也可发生钙化,在组织中形成钙化区,所以需要经过脱钙过程。脱钙是制作骨组织切片的重要环节,尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。

乙二胺四乙酸(EDTA)与羟基磷灰石结晶的外层钙结合,形成可溶性的非离子化合物,同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解,pH中性时可起螯合作用。其特点是脱钙时间长,对骨组织的损伤少,酶活性(碱性磷酸酶)和细胞抗原性保存较好,制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析。

主要用途:

用于骨组织、牙齿等脱钙。

使用说明:

1.将骨组织截成0.5cm×0.3cm×0.2cm大小骨片,生理盐水清洗后立即投入冷冻的固定液中,4℃固定 12 h~24 h;固定结束后骨片在0.2mol磷酸缓冲液中充分漂洗。

2.漂洗后投入脱钙液中,室温下脱钙,每日检查脱钙情况,直至骨片脱钙完全为止。脱钙结束后,骨片用蒸馏水冲洗20min,脱钙液每隔4-5天更换一次新液,经过 3次更换新液后,此后每天更换新液,但请根据具体实验具体分析。以大头针能刺进骨密质为完成脱钙标准。

3.然后进入常规脱水处理程序并包埋、切片。

注意事项:

1.为使脱钙更为充分,每次zuì好更换新液,这既弃去了脱掉的钙盐,增加脱钙强度,又起到降低脱钙温度的作用。

2.脱钙时间以脱钙完成为标准:以大头针能轻易刺进骨密质为准。

3.脱钙温度不要太高,一般以室温(25℃)为宜,高温可加快脱钙速度,但可破坏组织中的核酸而影响染色效果。低温(4℃)则会减慢脱钙速度,使组织在脱钙液中浸泡过久而引起损伤。

4.为了提高 EDTA的脱钙速度,骨组织取材尽量取薄。

5.为了提高 EDTA的脱钙速度,也可以采用微波脱钙。用微波炉辅助脱钙可以大大缩短脱钙时间,以微波间歇脱钙,每次辐射1分钟,每次辐射之间都将烧杯移至室温,冷却 5分钟,以保证每次的微波辐射脱钙液的温度不至于太高(70℃)。脱钙时脱钙液温度过高,易导致假阴性,背景色深等缺点。因此,在时间要求不紧迫的前提下,该方法也不应是。

6.为达到骨组织既充分脱钙,又保护骨组织的抗原不受破坏,需要对含钙的组织充分固定之后再进行脱钙。然后再行常规制片。

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