SYA138 卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒

特别提示：包括三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒

产品货号：SYA138

产品规格：48次/盒







根据您的关注的三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒，三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒，SYA138，百奥莱博，，，您可能还对以下产品有需求：







名称：炭疽杆菌单重荧光PCR检测试剂盒(分别有检测Capa/Rob/PAG的试剂盒)

货号：SYA014

规格：48次/盒

一、简介

本试剂盒用三对炭疽杆菌特异性引物(Cap/robB/pagA)，各结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对炭疽杆菌核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。



二、用途

该试剂盒适用于检测皮肤水泡液、咽拭子、可疑食物等样本中的炭疽杆菌特异性核酸序列(pX01质粒-pagA基因；pX02质粒-cap基因；染色体-rpoB基因)进行扩增，用于炭疽杆菌感染的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。



三、试剂盒组成(48T)

组份 数量 规格

反应液(qPCR MIX) 1管 480μL/管

pagA荧光引物和探针 1管 240μL/管

Cap荧光引物和探针 1管 240μL/管

rpoB荧光引物和探针 1管 240μL/管

DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管

阴性对照(NTC) 1管 50μL/管

阳性对照(PTC) 1管 50μL/管



四、荧光PCR仪器适用范围

ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。



五、储存条件及有效期：

本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。



六、样品采集、前处理与DNA提取

6.1 样品采集

皮肤炭疽，取水泡液1mL；肺炭疽，采集咽拭子标本，放入标本采集管中；肠炭疽，取粪便1g。

6.2 样本前处理：

固体样本：手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中，液体样本：直接取上100μL于1.5mL灭菌离心管中。

6.3 DNA提取

可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)，并按照相应试剂盒说明进行操作。

对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；

 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议zuì后在样品制备区域加入阳性对照。



七、检测步骤

7.1 试剂的准备

从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)、引物及探针，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。

设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量

荧光PCR反应液 10µL N×10µL

Cap或robB或pagA引物及探针 5µL N×5µL

总量 15µL N×15µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。

7.2 qPCR反应条件

将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。

推荐循环条件:

1循环 50℃ for 2 min

预变性 1循环 95℃ for 10 min

PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。



八、结果分析

8.1 结果分析条件设定

直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的zuì高点为准。

8.2 试验成立判定

(1) 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。

(2) 阳性对照(PTC)：均产生扩增曲线。

(3) 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。

8.3 结果判定

(1) 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明核酸阳性。

(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明核酸阴性。

(3) 如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。

(4) 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明核酸阳性；否则判为样本阴性。



九、注意事项：

(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。

(2) 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。

(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。

(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。

(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。





关注三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒，三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒，SYA138，百奥莱博，，的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：





SYA002 沙门氏菌单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒

SYA003 志贺氏菌单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒

SYA005 金黄色葡萄球菌单重荧光PCR检测试剂盒(定性/定量) 48次/盒

SYA012 副伤寒杆菌单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒

SYA027 溶藻弧菌单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒

SYA041 金黄色葡萄球菌肠毒素B单重荧光PCR检测试剂盒（定性/定量） 48次/盒

SYA044 肺炎链球菌单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒

SYA046 结核分枝杆菌单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒