JN0033 超敏genotyping PCR

特别提示：包括超敏genotyping PCR试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：超敏genotyping PCR试剂盒

英文名称：genotyping PCR kit

产品货号：JN0033

产品规格：1ml×5



  本制品是将 genotyping PCR反应所需的全部试剂、dNTP及PCR增强剂，为预先配制成2倍浓度的混合物。

  2×genotyping Taq PCR MasterMix专为常规PCR快速扩增及基因组 DNA等复杂模板快速PCR扩增检测设计优化。本产品使用方便快捷，使用时只需加入引物及模板并加入去离子水稀释至1×即可进行反应。

  2×genotyping Taq PCR MasterMix提供普通型/快速上样型两种形式供您选择，经测试，染料的加入不影响扩增性能，在PCR反应完成后可直接电泳，节省时间。

  本品适用于从复杂背景中扩增微量模板DNA。由于Genotyping PCR的突变率高于普通PCR反应，故其产物不推荐用于需高保真的基因克隆。

  Genotyping PCR所用引物需精心设计，否则会扩增出较多杂带（参见PCR引物设计的黄金法则）。



应用实例：



扩增灵敏度检测对比：2×Taq PCR MasterMix（左图） VS 2×genotyping Taq PCR MasterMix（右图）

用浓度为100ng/μl的人基因组DNA将浓度1ng/μl含LacZ基因的质粒梯度稀释至一下浓度梯度：0.1ng/μl、0.01ng/μl、1pg/μl、0.1pg/μl、0.01pg/μl、1fg/μl 从每个浓度梯度中各取1μl作为扩增模板，分别用2×Taq PCR MasterMix 及2×genotyping Taq PCR MasterMix 对LacZ基因进行扩增（都分别进行40轮PCR扩增循环）。

结果显示：2×genotyping Taq PCR MasterMix检测灵敏度比 2×Taq PCR MasterMix高1,000倍以上。 泳道M：DNA Ladder 2000； 泳道1～6：分别对应以上各模板浓度梯度



常用反应体系：

组分	体积
2×Reaction Mix*	10μl
上游引物	0.05uM（终浓度）
下游引物	0.05uM（终浓度）
模板DNA	1-3ul DNA样品
Taq酶（5U/μl）	0.25μl
ddH2O	至20μl
*反应体系可成比例调整至50μl等体积

常用PCR循环：

93℃	1分钟30秒
40次循环	93℃，30秒 57℃，30秒（57℃适用于大多数反应，亦可在55-60℃调整） 65℃，按产物长度60秒/1KB计算
4℃	保温

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