特别提示:包括台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒
英文名称:Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
产品货号:SY0508
产品规格:100T|500T
本试剂盒各组分均以无菌形式提供,可直接用于细胞实验。台盼蓝(Trypan Blue),一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料,可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜,将其染成蓝色,而活细胞由于其细胞膜的完整性,可将台盼蓝排斥在外,因此,通过颜色的变化即可将活细胞(活细胞呈透明无色)和死细胞鉴别开来,基于此原理,本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外,台盼蓝(合适浓度)还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。
使用方法
1)对于悬浮细胞,离心收集细胞,对其充分清洗后,加入适量细胞重悬液重悬细胞制成单细胞悬液;对于贴壁细胞,先用胰酶消化细胞,再按照悬浮细胞的方法制备单细胞悬液。
2)取0.1ml单细胞悬液,按照1:1比例与0.1ml 0.4%台盼蓝染色液充分混匀,室温染色3~10min。
【注】:因台盼蓝具有细胞毒性,染色时间过久会导致部分死细胞染色,干扰计数。通常染色3min即可。
3)取少量上述染色细胞加入血细胞计数板,于显微镜低倍镜下计数,分别计算着色细胞(即损伤细胞和死细胞)和总细胞。
【注1】:用移液枪加染色细胞时,沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不可过量加液或者不足量。
【注2】:1mm2方格内细胞数通常控制在20-50 cells,当细胞数超过200个,需重新调整稀释倍数。
4)按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比,
a,计算每ml细胞数目:Cells/ml=1mm2大方格内的平均细胞数×稀释倍数×104;【注】:此时的稀释倍数为:步骤2所取的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数
b,总细胞数目:Total cells=(Cells/ml)×zuì初制备单细胞悬液的总体积
c,细胞活力值:Viability(%)=(总细胞数-总着色细胞数)/总细胞数×100
【注】:通常情况,健康的对数期培养细胞,活细胞至少占到95%。
注意事项
1)细胞计数前需对细胞进行充分的清洗,因为细胞对血清蛋白具有非常高的亲和力,残留血清蛋白会导致较暗的染色背景。
2)台盼蓝对人体有害,请注意小心防护。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:室温,有效期2年
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