人、小鼠、大鼠、猪等种属ELISA试剂盒

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ELISA生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。

实验原理： 
 上海酶研生物试剂盒检测方法有:双抗体夹心法、间接法、竞争法

试剂盒组成：

规格	96T		规格	48T
试剂盒组成			试剂盒组成
30倍浓缩洗涤液	20ml×1 瓶		20倍浓缩洗涤液	20ml×1 瓶
酶标包被 板	12孔× 8 条		酶标包被 板	12孔×4条
酶标试剂	6ml× 1 瓶		酶标试剂	3ml×1 瓶
样品稀释液	6ml× 1 瓶		样品稀释液	3ml×1 瓶
显色剂A 液	6ml× 1 瓶		显色剂A 液	3ml×1 瓶
显色剂B 液	6ml× 1/ 瓶		显色剂B 液	3ml×1/ 瓶
终止液	6ml× 1 瓶		终止液	3ml×1 瓶
标准品	0.5ml× 1 瓶		标准品	0.5ml× 1 瓶
标准品稀释液	1.5ml× 1 瓶		标准品稀释液	1.5ml× 1 瓶
说明书	1份		说明书	1份
封板膜	2片（96）		封板膜	2片（48）
密封袋	1个		密封袋	1个

标本要求 
1.血清：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
2.血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
3.尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
5.培养细胞:
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

• 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2000pg/ml	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
1000pg/ml	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
500pg/ml	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
250pg/ml	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
125pg/ml	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

• 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品ZZ稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
• 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
• 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
• 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
• 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
• 温育：操作同3。
• 洗涤：操作同5。
• 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
• 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
• 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结：

计算
  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。


注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

• 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔DY孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请ZH乘以总稀释倍数（×n×5）。
• 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。

保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
本说明书48T同样适用

上海酶研生物ELISA试剂盒特点体现：
    一、GX、灵敏、特异---采用全进口材料和抗体
　　二、稳定的重复性和可靠性---领先的科技水平
　　三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体---严格的生产流程和规范操作

酶研生物ELISA试剂盒适用范围：
一．适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
二．可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等
三．可检测指标齐全：白介素，干扰素，血管紧张素，肺炎衣原体，趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、炎症因子、血管生成素 等等 指标

酶研生物ELISA试剂盒免费代测服务：
1.每个指标需提供100微升样品，如做复孔则200微升
 
2、标本离心处理后请使用泡沫箱加冰袋邮寄至我司；
 
2、样本在一周内使用，保存条件2-8度；
 
3、代测服务只反馈实验结果原数据信息，不再提供相应试剂盒；
 
4、需支付相应试剂盒费用，代测不产生任何费用；

上海酶研生物科技有限公司坐落于上海闵行高科技园区，现拥有来自人、小鼠、大鼠、兔、猪等种属的试剂盒5000余种，还可根据客户要求定做试剂盒，提供免费代测服务。质量好，使我们拥有源源不断的客户；价格低，薄利多销是我们生存的优势​；服务好，让我们在业界拥有很好的口碑。我们将一如既往坚持质量DY，诚信为本的理念。​感谢新老客户的博爱！！
 
        ★★★★★ 上海酶研生物科技有限公司郑重承诺★★★★★
凡购买本公司试剂盒有非人为质量问题，收货后十五个工作日内包退换