iTRAQ同位素标记定量技术(iTRAQ)-4标-8标

同位素标记相对和定量(isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation, iTRAQ) 技术的发展得益于可进行多重标记的iTRAQ试剂的开发，该试剂结构由指示基团、中性平衡基团和反应基团三部分组成。不同指示基团及其相对应平衡基团的质量和都相同，而反应基团能与赖氨酸ε氨基和所有肽链的氨基末端连接，可标记所有氨基酸。不同标记试剂与来源于不同样品胰酶消化后的肽段结合，经过色谱分离，并通过一级质谱和二级质谱。平衡基团在二级质谱时发生中性丢失，而报告基团在二级质谱低质量区域产生多个报告离子，其信号强度分别代表该标记样品的表达量，根据报告离子的峰面积计算同一蛋白质同一肽段在不同样品间的比值，从而实现蛋白的相对和定量。

服务优势：

●高通量
试剂盒的选择：试剂盒分为4标和8标两种，根据样本组数选择。Z多一次可以同时进行8组样本的分离鉴定和相对定量。省时且限度的减少了系统误差。
●重复性好
依靠大型质谱完成定性、定量同步，且一批次可完成至多8组样本实验设计，大大增强重复性。可以给出每一个可检测到的蛋白在组间的ratio值。
●准确定量
利用碰撞诱导的解离后进行第二级质谱分析时，带不同同位素标记的肽段被检测到的峰图，根据峰面积对比差异，定量更为JZ
●鉴定结果真实
二级质谱产生质量高的b、y离子系列，蛋白序列匹配率提高，鉴定结果可靠真实。同时，一个蛋白质由多个肽段匹配达到置信度，进一步提高结果质量的可靠性。
●操作简单
标记过程简单，反应时间短，标记稳定，质谱检测快捷灵敏
●检测的蛋白范围广
以往2-D实验无法满足的样本量精少的、疏水性蛋白、以及pH3-10以外的蛋白都在itraq实验中都得以满足。