WH0198 重组菌落鉴定试剂盒（PCR法)

特别提示：包括重组菌落鉴定试剂盒（PCR法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：重组菌落鉴定试剂盒（PCR法)

英文名称：Recombinant colony PCR Identification Kit

产品货号：WH0198

产品规格：50次



本试剂盒包含一管便携式PCR MasterMix预混系统，无需您一一加入各种成分，直接加入筛选到的单菌落，经过1小时左右的PCR反应和电泳检测即可得到重组菌落鉴定的结果。



PCR法鉴定重组菌落。其原理主要是选择合适的引物，根据灵敏的PCR扩增反应，将阳性宿主菌体内载体的目的片段扩增出来，方便地进行鉴定，无需进行菌体的过夜培养和质粒提取，大大地节省了时间和精力。



产品特点：

方便快捷：省去了菌体培养和提取质粒的时间与费用，快速简便地鉴定重组子。

准确灵敏：鉴定的准确度达90%以上。



试剂盒组成：

组分	规格
2×Taq PCR MasterMix	500μl
T7 primer（10μM)	50μl
SP6 primer（10μM)	50μl
ddH2O	1ml

保存条件：-20℃可长期保存，2×Taq PCR MasterMix多次冻融不会影活性。如需经常使用，可存放于4℃。



注意事项：

1．重组菌落鉴定时，挑取单菌落前，应先做好标记，便于鉴定后使用。

2．挑取菌落时，应选择单菌落，不要挑取太多菌体，以免影响PCR结果。

3．设定PCR程序时，请根据插入片段大小决定延伸时间，如果插入片段大小为1kb以下，延伸时间30sec即可，如果片段更长，可按此比例增加延伸时间。



操作步骤：

以下举例仅供参考，实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况，设定zuì佳反应条件。



1．按以下体系配好含有引物的PCR反应液。

成分	使用量
T7 Primer（10μM)	1μl
SP6 Primer（10μM)	1μl
2×Taq PCR MasterMix	10 μl
ddH2O	8 μl

2．将过夜培养的平板上的菌落编号后，使用灭菌的牙签挑取一部分单菌落加入上述反应液，剧烈振荡使菌落充分分散到反应液中。

3．短暂离心收集管中的液体后，进行PCR反应。

4．PCR反应循环的设置：



  注意：延伸时间请根据插入片段大小调整。

5．结果检测：反应结束后取5 μl反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。



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