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HQF11 全血免抽提直接PCR试剂盒

产品信息

特别提示:包括全血免抽提直接PCR试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!




产品名称:全血免抽提直接PCR试剂盒

产品货号:HQF11

产品规格:100次/500次/1000次



血液直接PCR试剂盒(Blood Direct PCR kit)是在新一代DNA聚合酶基础上,专门为全血DNA直接扩增设计的试剂盒。使用血液直接PCR试剂盒,可直接从含有 1-25%(v/v)全血的反应液中直接扩增DNA片段,而不需要前处理或DNA提取,大大降低了污染风险,缩短时间和节约支出。

PCR的产物可以通过琼脂糖凝胶电泳和EB染色进行分析,进行下游的常规操作,例如限制性酶切、DNA测序、dHPLC分析等。

产品可以应用于以下领域:

(1)人类、其他哺乳动物和鸟类基因分析;

(2)可 用于常规检测:限制性酶切、琼脂糖凝胶电泳/EB染色、荧光毛细管电泳、DNA测序或dHPLC分析;

(3)亲子鉴定;

(4)SNP分析(限制性酶切);

(5)临床样本检验。

产品优势: 

(1)无需DNA提取,降低污染风险,缩短时间与节约成本;

(2)从新鲜血液、4℃保存2年以上EDTA抗凝的全血、EDTA或肝素抗凝剂血、样品拭棒、Whatman903滤纸等各种血液样品中直接扩增DNA;

(3)与现有的操作流程、实验步骤、常规检测手段兼容。

贮藏条件:

Direct PCR kits 可在-20℃下保存,有效期1年以上。



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名称:taq酶抗体

货号:BTN130815

规格:500U

Taq Antibody是Hot Start PCR用抗Taq抗体,其与Taq酶结合后YZDNA聚合酶活性。使用本制品进行PCR扩增时,高温变性前抗Taq抗体与Taq酶结合YZDNA聚合酶活性,能够在低温条件下有效YZ引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq抗体在PCR反应zuì初的DNA变性步骤中变性,DNA聚合酶活性恢复,达到Hot Start PCR效果。使用本制品无需特殊的抗Taq抗体失活处理,可以在常规PCR反应条件下使用。其工作原理如下:





储存条件:低温运输,-20℃保存、有效期一年。



活性定义:Taq Antibody与Taq DNA Polymerase混合,25℃,10 min温浴后,在55℃,10 min条件下YZ90%以上的1U的Taq DNA Polymerase活性的Taq Antibody量定义为1U。



纯度:

1. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA-Hind III在37℃或70℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

2. 10 U的Taq Antibody和1μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃或70℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

3. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA在37℃或70℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

4. 10 U的Taq Antibody和1μg的16S,23S rRNA在37℃或70℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。

5. 35Cycles的PCR反应条件下,无Mouse Genomic DNA的污染。



名称:PCR级绿如蓝DNA染料

货号:BTN70909

规格:0.1mL

第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会YZ荧光PCR,所以反应重复性很不稳定,并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一样,是第三代饱和型荧光染料,在饱和浓度下也不YZ荧光PCR反应。



产品特点:

1. 饱和浓度不YZPCR反应,因此得到的荧光信号更强。

2. 抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前zuì常用的SYBR Green I。

3. 饱和浓度下染料分子没有机会在DNA分子间发生移位,因此荧光强度跟DNA变性程度呈线性关系,可以用于精细的Tm 测定实验,如High-resolution melting curve analysis等。

4.跟目前常用的PCR 仪器(包括iCycler、LightCycler、ABI 测序仪)兼容。激发和发射光谱跟FAM和SYBR Green I 接近,可以使用SYBR Green I的光学设置参数。

5. 不能渗透进入细胞内,毒性和致突变性远低于SYBR Green I。

6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲线分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛细管电泳等研究。



储存条件:常温运输、-20℃避光保存,有效期一年。



使用方法:

先将本产品放置在室温融化,然后震荡10秒钟,短暂离心后待用。下面以50μL的标准PCR反应体系为例说明其使用:



1.在一干净的PCR 管中,加入下列成分:


试剂

加入量

10×PCR Buffer(No Mg2+)

5μl

MgCl2 50mM

2.5μl

dNTP 10mM

1μl

本产品(PCR级绿如蓝染料)

2.5μl

Taq DNA聚合酶

1-5U

DNA模板

适量

PCR引物

5-50 pmol each

补水到

50μl


2. 放入荧光PCR 仪中进行qPCR,并在退火或延长反应时记录荧光信号。使用的光学参数可以跟FAM或SYBR Green I 完全一样。



注意事项:

1. 如果使用iCycler,可以不加FAM;如果使用ABI系统,需要在Well Inspector选项下的非特异参照中选择“无”;使用LightCycler时,zuì好在PCR 体系中再加入终浓度为0.5mg/mL的BSA以降低仪器对染料和模板的非特异吸附。

2. 如果使用化学修饰过的Taq DNA聚合酶,可能需要减低KCl的浓度并提高Tris的浓度。

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