荷兰Applikon Biosep声学细胞截留系统（灌流培养）

　　BioSep声频过滤器不是设计来超纯化收集培养液中的细胞的。相反，少量的流失率允许控制细胞流失，这样有利于培养细胞活力。
　　BioSep典型的分离效率范围为90-99%。
　　BioSep分离腔安装在生物反应器的顶盖上。细胞悬浮液通过循环泵泵入分离腔。接着培养液被分成收集液和回流液。通过BioSep的流速可由收集泵控制。BioSep内的超声使细胞聚集并维持悬浮细胞静止，而不随收集的培养液流出。沉降的聚集细胞随返流快速回到生物反应器中，并被搅拌分散。
　　传统的细胞截流设备包括过滤器、沉降器和离心设备。不管它们设计如何，过滤表面都易结垢。沉降室和离心设备仅仅靠细胞和培养液密度差异进行分离。
　　现在用于生产抗体的主要生产设备是搅拌槽反应器。象搅拌槽反应器一样均一的系统是目前能够达到的单位反应器体积，具有的单位生产能力。这个生产能力可以通过使用细胞截流设备显著提高。
　　对细胞浓度高达2×10⁷个细胞/ml的反应器。BioSep对收集培养液中细胞的去除率在90%-99%之间。
　　BioSep系统（10L，50，200L）的分离效率通过调节输入谐振器的声频能量，BioSep和收集泵的运行/停止循环时间比率来控制。

声频灌流培养优势（与批次培养相比）
　·提高培养基的使用效率（例如，生长培养基低血清浓度），可达5倍以上的效率。捕获和循环的细胞利用营养仅维持它们的代谢和产物的生物合成
　·10-20倍以上活细胞浓度
　·每天每个反应器体积抗体的产量比批次培养高10-100倍以上（高体积生产率）
　·由于稳态条件下，更易在线控制
　·减少产物暴露在蛋白酶条件下的时间
　·收集液中抗体浓度提高了2-5倍（与批次培养相比）
　·分泌产物的下游处理减少到一步

由于高的声频对照，活细胞被截留在声频过滤器的效率比死细胞和细胞碎片要高得多。这导致非活细胞具有明显更高的逃逸率，从而限制死细胞在反应器中积累。这个效果对灌流有利：它选择性截流生产细胞，从反应器中去除无生产能力的死细胞。
◆BioSep的特点：
　·超声谐振场细胞过滤
　·连续操作
　·低剪切力的环境
　·简单的设计
　·紧凑的可在灭菌锅灭菌的设备
　·紧凑的在位灭菌设备
　·可放大的系统
◆Biosep的优点：
　·无物理过滤器表面结污
　·无机械部件失效
　·小的截流体积
　·快的周转时间
　·提GX率
　·宽的流速范围
　·高细胞活力
　·一致的培养环境
　·易于安装
　·易于自动化
　·减少劳力
　·CIP

◆BioSep的型号：
目前BioSep具有10L（灌流速度为1-10L/天），50L（灌流速度为5-50L/天），200L（灌流速度为20-200L/天），1000L（灌流速度可达1000L/天）几个型号。

●灌流设置所需的泵和其他硬件（除BioSep腔体和控制器外）
收获(集)泵是一个变速泵。在停止期间， BioSep控制器（远程）控制泵停止，加速集聚细胞沉积。这意味着收集流停止几秒，流体停留在分离腔内。几秒的停留时间会影响一点整个收获液的流速。这个泵可通过在BioSep控制器和泵之间连接一个线缆来直接控制。
对黏附细胞培养和太大的聚集体，建议选配具有满速反转（Z288010020）的变速泵。在停止时间，这个泵能以的泵速使收获液反向流动。贴壁细胞能粘在声学分离腔的玻璃上。通过停止期间全速的反流（3秒），这些细胞得到小的推力而回到生物反应器。每隔10分钟的反流导致更少的细胞贴在BioSep腔内。
除收集(获)泵外，还需循环泵、补加新鲜培养基的泵、管道及接口等。