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人类血管生成因子抗体芯片1000——玻片芯片

产品信息
  • 人血管生成因子抗体芯片1000
    RayBio® Human Angiogenesis Antibody Array1000 Antibody List
    检测43个指标

     

    Angiogenin (ANG) GRO (CXCL1,2 & 3) IL-8/ CXCL8 PIGF/ PGF TIMP-1
    bFGF/ FGF-2 IFN gamma Leptin RANTES/ CCL5 TIMP-2
    EGF IGF-I MCP-1/ CCL2 TGF beta 1 VEGF-A
    ENA-78/ CXCL5 IL-6 PDGF-BB Thrombopoietin (TPO) VEGF-D

    Angiopoietin-1 GM-CSF IL-4 MMP-1 (pro & active) uPAR
    Angiopoietin-2 (ANG-2) I-309/ CCL1 IL-10 MMP-9 (pro & active) VEGF R2
    Angiostatin IL-1 alpha I-TAC/ CXCL11 PECAM-1 VEGF R3
    Endostatin IL-1 beta MCP-3/ CCL7 Tie-2  
    G-CSF IL-2 MCP-4/ CCL13 TNF alpha  
     

    一、实验原理
           该芯片采用夹心法,其原理是将捕获抗体预先固定在固相载体上,生物样品加入到芯片上一起孵育反应后,其特异性的抗原与捕获抗体结合,然后加入生物素标记的检测抗体一起孵育,通过HRP-链霉亲和素与化学发光底物、或者荧光染色剂-链霉亲和素结合作为信号检测。基于“三明治”双抗体夹心法建立的芯片,高品质的抗体对是此方法的关键,夹心法有很高的灵敏度,检测浓度可以低至1-10 pg/mL;每增加检测一个蛋白,芯片上就需要增加一个抗体对,这样可能出现交叉反应,因此需要将每个抗体对与芯片上其他抗体对进行检测,验证是否可以引入这个抗体对,且不对其他抗体对检测造成干扰,通过优化筛选将交叉反应降到Z小。
     
           由于抗体对之间可能存在的相互影响,夹心法抗体芯片一次性检测蛋白的数量有所限制,但是可以用于蛋白的定量检测。目前,RayBiotech验证配对的抗体对有大于600种抗体对,基于双抗体夹心法开发的半定量芯片有40多种,定量抗体芯片有大于45种,涵盖的因子450多个,包括炎症因子、凋亡因子、生长因子、肥胖因子、血管因子、信号转导磷酸化、白介素等等各个疾病相关的因子。夹心法芯片具有特异性好、灵敏度高、重复性和稳定性好的优点。

    二、实验原理图:
     
     
          
     
    三、芯片载体的区别和选择:

    RayBiotech 的芯片共有2种载体,一种是膜载体,一种是玻片载体。

    1. 膜载体,就类似于Western Blot 实验采用的NC膜或PVDF膜,采用ECL化学发光作为显色信号,这种膜载体相对玻片载体使用时,需要等多一些样品用量,但凡是可以用于WB实验室的都可以使用RayBiotech的膜芯片,通用性高。

    2. 玻片载体,是采用载玻片一样的玻璃片作为芯片载体,用Cy3或Cy5,绿色荧光信号作为显色信号,样品用量少,但需要与基因芯片通用的荧光扫描仪。
    温馨提示:不可用于临床ZL。
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