BirA酶（生物素连接酶)

货号：       DM001

规格：       50ml

来源：       E. coli.

储存缓冲液： 50 mM Tris(pH 8.0), 150 mM NaCl, 20% Glycerine, 1 mM DTT.

储存条件：   于干冰中运送，到达后要立刻置于-80°C中。解冻后分装，近期使用可保存于4°C，长时间的使用需保存于在-80°C.

浓度:        5 mg/mL

酶活性:      5000 Units/µg

生物素蛋白连接酶；

            生物素蛋白连接酶活化生物素形成生物酰5’ 腺苷酸，再将生物素转移到生物素受体蛋白上。它是生物素的操纵子的YZ物，由birA基因编码.

Mol wt       35000

试剂盒组成 ：

BiomixA（0.5M bicine。pH 8.3）:1ml, 冻存-20℃

BiomixB(100mM ATP, 100mM MgOAc, 200mM biotin): 1ml, 冻存-20℃

BirA enzyme(3mg/ml):50ul，冻存-20℃

d-biotin(500 mM biotin):1ml，冻存-20℃

实验步骤

以700 µl纯化好的 MHC/peptide 复合物（1-2mg）为例：加入：

100 µl BiomixA，100 µl BiomixB，100 µl d-biotin，10 µl BirA enzyme (30 µg)，0.5 ul pepstatin (2 mg/ml in DMSO)，0.5 µl leupeptin (2 mg/ml in dH₂O)

室温孵育过夜（反应液中不要有EDTA）