SNP分型检测服务
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SNP分型检测
单核苷酸多态性(SNP)是指有单个核苷酸替代、插入或缺失而形成的分子形态。SNP是人类基因组中数量Z多的一种多态形式,人类基因组中总共有300万个SNP,平均每1000个碱基中就有一个SNP。其中有相当多SNP位点直接或者间接与个体间的表形差异,人类对疾病的易感性或抵抗性能力有关。
应用各种突变检测技术检测到的基因突变,都需用序列分析才能确定突变类型及突变位置,其效率可以达到100%,主要有测序法和探针法两种方法。
1,测序法:现在的测序方法已与经典的方法有了很大的不同,其基本原理虽仍是双脱氧终止法,但自动化程度大为提高,操作更简便,测序时间也大大缩短。随着PCR技术与测序联合使用,不需经过M13亚克隆步骤,故称为直接测序法(direct sequencing,DS)。
2,探针法:实验原理:探针只与模板特异性地结合,其结合位点在两条引物之间。探针的5′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等,3′端标记有荧光淬灭基团(Quencher, Q),如TAMRA等。当探针完整的时候,报告基团所发射的荧光能量被淬灭基团吸收,仪器检测不到信号。随着PCR的进行,Taq酶在链延伸过程中遇到与模板结合的探针,其5′→3′外切核酸酶活性就会将探针切断,报告基团远离淬灭基团,其能量不能被吸收,即产生荧光信号。在探针的5’端使用不同的Report荧光基团,单一PCR中可以检测到多个探针的杂交与相应荧光。只有与模板完全匹配的TaqMan探针在与等位基因发生特异性杂交后,利用Taq酶的5’外切酶活性作用使得探针的5’Report荧光能够被检测。
我们可以按照待检测SNP位点的数量、特点和标本量为您设计相对经济合理的SNP分型方法
快基SNP检测实验步骤如下:
(1)客户收集标本(血液或组织等标本);
(2)确定基因突变SNP位点, 设计合成特异PCR扩增普通引物及探针,并在NCBI网站做BLAST;
(3)进行PCR扩增,通过SNP分型获得实验报告;
(4)分析报告,给出实验结果;
三、承诺
快基提供全面的检测服务,客户只需提供待测的样本和待测基因SNP位点,就可以获得全部的实验结果,我们保证结果真实、准确、快速、完整;