Biotium PMA DNA修饰染料 检测活细菌死细菌
- 品牌：Biotium
- 型号：40013
- 供应商：北京博晟思远生物科技有限公司
- 供应商报价：¥1861
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产品库
如何能够GX灵敏的检测死细菌中存在的活细菌数量在实际应用中至关重要，包括食品安全检查，饮用水质量控制和药物诊断等。而传统使用的细菌培养的检测方法，既费时又不够灵敏。
以PCR为基础的替代检测方法具有快速和高灵敏度特点。然而，基于 PCR的检测方法并不能有效的将活细胞和死细胞区分开来。近年来，Biotium公司研发的新型DNA修饰染料-叠氮碘化丙锭 (PMA™) 成功的克服了该难题。只需在进行PCR检测前使用PMA预处理细菌样本，就能够选择性的检测活细菌，此方法敏感性高，检测结果可靠。
PMA™ 是一种与DNA具有高度亲和性的光反应染料。该染料可以嵌入在双链DNA中，当暴露在强烈的可见光下时可以与DNA形成共价连接，从而实现对DNA的化学修饰。而经修饰后的DNA将不能通过PCR进行扩增 (Figure 1)。 由于PMA™ 被设计为不能被细胞膜穿透性，因此当使用该染料处理同时包含死细菌和活性菌的样品时，只有细胞膜结构受到破坏的死细菌中的DNA能够被化学修饰。接下来可以进一步裂解活性菌并进行qPCR检测，从而实现对活性菌的选择性检测。同时，PMA™-PCR技术不仅能够应用于细菌检测，同样也可以用于其他微生物的检测（详见PMA™ 应用列表）。
| 图2(A)：大肠杆菌PMA™-qPCR扩增曲线图。未经处理和经过热激灭活的大肠杆菌分别使用PMA染料进行预处理，然后进行qPCR检测。 qPCR 使用16S rRNA 引物。 | 图2(B)：活、死大肠杆菌经PMA™处理和未经PMA™处理后的ΔCt值。(ΔCt = Ct with PMA™ – Ct without PMA™). |
New! PMAxx™ for Viability PCR
PMAxx™作为PMA™的替代升级产品，具有更高的灵敏性。尽管PMA能够通过qPCR有效的区分死细菌和活性菌，但并不能够完全排除来自死细胞DNA的PCR产物，从而带来潜在的假阳性结果。作为Biotium公司的新型染料，PMAxx™能够更加GX的YZ死细胞中DNA的PCR扩增，从而更好的区分死细菌和活性菌。
Download the PMA™ and PMAxx™ flyer to learn more.
New! PMA™ Enhancer for Gram-Negative Bacterial
图4：经温和热激（56℃ 3小时）灭活的大肠杆菌进行PMA™或 PMA™+Enhancer处理，用PMA-Lite光分解后提取DNA。随后使用Fast EvaGreen® qPCR Master Mix扩增大肠杆菌DNA中377-bp片段。qPCR结果表明与PMA™单独处理的死细胞相比，PMA™+Enhancer处理过的死细胞扩增Ct明显延迟，而只使用Enhancer处理则对样品PCR没有影响。
PMA™ Enhancer能够有效地改善通过PMA™来区分革兰氏阴性菌中死细菌和活性菌。我们提供的PMA™ Enhancer为5倍浓缩液，可在使用PMA™之前添加到样品中。当对经过Enhancer预处理过的革兰氏阴性菌中的 进行PCR检测时，样品中死细胞的信号明显减弱，而活细胞的信号则没有变化。PMA™ Enhancer也可以与PMAxx™作为搭配使用。因此，同时使用PMA™ 和PMA™ Enhancer可以有效的对革兰氏阴性菌进行viability PCR检测。 PMA™ Enhancer作为一个独立的产品提供。另外，在PMA Bacterial Viability Kits（革兰氏阴性菌专用）中也包含该产品。
New! PMA™ Real-Time PCR Bacterial Viability Kits
PMA™-PCR试剂盒可以用来通过使用PMA™染料和qPCR选择性的检测特定菌群中活细菌。试剂盒包含PMA™或PMAxx™染料，Fast EvaGreen qPCR Master Mix和经过验证的PCR引物，可以用于检测食品安全，公共卫生和 KJ研究广泛关注的特定菌株。
试剂盒包含：
• PMA™或PMAxx™染料
• Fast EvaGreen qPCR Master Mix
• ROX 校正染料
• PMA Enhancer（仅适用于革兰氏阴性菌）
• 特定菌株经验证的PCR引物
PMA Real-Time PCR 细菌活力检测试剂盒适用于:
更多详情请下载 PMA Real-Time PCR Kits.
用于PMA光分解的PMA-Lite™光解仪
Biotium 公司提供的PMA-Lite™ LED 光分解仪， 可以用来对PMA及其他光反应染料进行控制时间和温度的光处理。
