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HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株 含STR鉴定

产品信息
  • 上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株，其中人的已通过STR鉴定的有几百株，欢迎各位选购。。。。。。

    产品名称：HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株 含STR鉴定
    特点：细胞代数为4代以内，细胞耐药倍数8倍以上；
    包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书
    细胞来源：ATCC、sciencell、ICLC
    货期：1-2周
    运输方式：快递运输
    售后：收到细胞后12天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员，我们将尽快为您解决！
    注：耐药细胞培养操作流程和普通细胞培养方法基本一致，只是在培养中会加药维持筛选压力
    • HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株 含STR鉴定
       
    • 三、细胞生长条件：
     
    • 组成：
    组份 数目
    细胞  1 T-25瓶
    细胞说明书 一份
    • 细胞简介：
    生长特性： 贴壁生长
     
    细胞来源： 从ATCC/中科院/协和医院等地引进
    培养条件： 培养基：F12K+0.1mg/ml肝素+1%ECGS +10%FBS（推荐德国SERANA S-FBS-SA-015优等胎牛血清）
    气相：空气95%，二氧化碳5%
    温度：37℃
    培养：
    • 贴壁细胞
    1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代；
    2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，次传代比例为1:2。
    3传代步骤：将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入1mlPBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为Z佳消化时间，记录Z佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入1ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。

    二、悬浮细胞
    1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒，然后置于无菌操作台，打开瓶口，轻轻吹打后，将其中的细胞悬液转移到离心管中，然后1200rpm离心3min，去上清；
    2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鲜培养基，然后将其置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液（离心后去旧液，加入新鲜培养基）；
    3.显微镜观察细胞数目比较多时，对其进行传代，次传代比例为1:2（离心后平均分成两瓶培养）。
     
    细胞总数： 1~3*106
    传代周期： 2-3天
    传代比例： 1:2~1:4
    换液频率： 2-3天
    冻存液： 90%FBS+10%DMSO

    四、注意事项：
    1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
    2 瓶中运输的培养液不能重复使用，请换新鲜培养液培养
    3 对于贴壁细胞，若大部分细胞漂浮，置于培养箱隔夜观察，大部分漂浮细胞重新贴壁，表明细胞活力正常，继续培养，剩余漂浮的细胞可以去掉；若大部分细胞仍然不贴壁，将漂浮的细胞离心收集，用台盼蓝染色鉴定细胞活力，并与本公司销售人员及时联系。
    4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片，记录细胞状态，如细胞状态出现问题请于72h内与本公司销售联系，以便于更好的帮您解决问题，超过时间我段，本公司则默认细胞状态良好，不免费对后续细胞状态问题进行售后。

    做细胞实验的同学看过来。
    选择上海琛艺生物细胞有3个理由：
    1、细胞状态好，形态佳，易成活，是市面上比较好养的细胞之一;
    2、物流迅速，复苏好后发货，次日就能到;
    3、使用我司推荐的进口品Pai血清进行培养实验，效果更佳。
     
     
    专业技术人员万工收藏的细胞培养小技巧:
    1. 买细胞要去靠谱的地方买，比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍，这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
    2. 不管是买的细胞，还是别人惠赠的细胞，刚拿到手赶紧的做两件事：检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存，冻存细胞复苏后第二天蕞好更换一次培养基。
    3. 发现细胞有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。
    4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快，比如说 MDA-MB-231，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢，比如 BT474，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。
    5. 对于娇弱的细胞，就得细心呵护。胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住，是每天。
     
     
    细胞培养常见问题及解决方法
    问题 原因 解决方案
    细胞生长缓慢 生长培养基使用不当 按照生产商的建议，使用相应的预热生长培养基。
    生长培养基中血清质量差 使用其他批次血清。
    传代操作不当 按照生产商的建议消化时间及传代比例进行操作。
    换液过于频繁 降低换液频率，参考生产商推荐的换液频率。
    细胞传代次数过多 使用传代次数较少的健康细胞。
    细胞生长超过汇合状态 哺乳动物细胞传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行，建议细胞密度达 80-90%传代。
    细胞被支原体污染 将细胞、培养基和试剂丢弃；新取一只冻存细胞，并且使用新的培养基和试剂。
    细胞复苏存活率低 细胞冻存不当 新取一只冻存细胞，并储存在液氮中。将细胞储存在液氮中，直至复苏。
    自行制备的冻存细胞无活性 将细胞按照生产商推荐的密度冻存。
    制备冻存细胞时使用传代次数少的细胞。
    严格按照生产商推荐的操作程序冻存细胞。请注意本手册推荐的冷冻程序是冻存细胞的一般流程，只能作为指导原则使用。
    新取一只冻存细胞。
    细胞复苏方法不当 严格按照生产商推荐的操作程序复苏细胞。请注意本手册推荐的解冻程序是复苏细胞的一般流程，只能作为指导原则使用。
    确保冷冻细胞解冻迅速，接种前用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。
    复苏培养基使用不当 使用生产商推荐的培养基。确保培养基使用前已经预热。
    细胞稀释过度 按照生产商的建议，将解冻后的细胞高密度接种，以改善复苏效果。
    处理细胞时动作不够轻柔 冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影 响。不要通过涡旋振荡或者用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外)，也不要高速离心细胞。
    冻存液中所用保护剂在储存过程中未避光 如果未避光储存，冻存保护剂会转变为对细胞有毒性的物质；新取一只冻存保护剂，重新冻存细胞。
     
     ★由于细胞库现有细胞类目多，为了不出现混乱错误，需要了解相关细胞价格及详细资料直接call，对您造成的不便还请见谅！
     ★注：如运输过程中导致细胞污染或者死亡，我们将无条件补发
           收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
    ，通过低温保藏储备一些细胞，以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象，或常规检测呈阳性结果，那么Z可靠的补救措施是扔掉所有培养物，清洁培养箱和超净台，一切从头开始。当然，你得确保储备的细胞是不含支原体的。
         。
    上海琛艺实业耐药细胞株提供STR鉴定，上百株细胞等待您的选购，欢迎咨询销售陈静。

     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
    • 信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（上海琛艺实业有限公司），内容包括 （HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株 含STR鉴定）的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （HCT-15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株 含STR鉴定）的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
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