Blasticidin S 杀稻瘟菌素S 灭瘟素

Blasticidin S 杀稻瘟菌素S 灭瘟素（浓度10mg/1ml）

产品信息（Invivogen原装，现货供应）：

 

货号	名称	产地	规格	报价	特价(元)	库存
ant-bl-1	Blasticidin S 杀稻瘟菌素S 灭瘟素 （浓度10mg/1ml）	Invivogen	10mg	598	598	是
ant-bl-1	Blasticidin S 杀稻瘟菌素S 灭瘟素 （浓度10mg/1ml）	Invivogen	10mg*2	1050	1050	是
ant-bl-1	Blasticidin S 杀稻瘟菌素S 灭瘟素 （浓度10mg/1ml）	Invivogen	10mg*5	2310	2150	是
ant-bl-1	Blasticidin S 杀稻瘟菌素S 灭瘟素 （浓度10mg/1ml）	Invivogen	10mg*10	4200	3700	是

作用机理：
Blasticidin S是一种来自Streptomyces griseochromogenes的核苷肽类抗生素，通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性YZ原核和真核生物的蛋白质合成。BlasticidinS用于筛选携带有bsr或BSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而的作用模式，很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。 基本信息：
CAS：3513-03-9分子式: C₁₇H₂₆N₈O₅, 1 HCl 纯度：>95%（HPLC）
分子量: 458.90 浓度：10 mg/ml in HEPES 缓冲液， pH 7.5
结构:

抗性基因：
目前经克隆和测序的杀稻瘟菌素耐受基因有3种，一种是分离自产生菌Streptoverticillum sp.的乙酰基转移酶基因bls，另外两种是脱氨酶基因，包括为从Bacillus cereus 中分离的bsr和从Aspergillus terreus 中分离的BSD 基因。bsr和BSD基因是Z主要的选择性标记基因，用于哺乳动物和植物细胞的基因转移实验，也可以用于E.Coli中。
应用浓度：
1）Escherichia coli（推荐浓度：25-100 µg/ml）
E. coli对BlasticidinS的敏感性稍差，转化子对Blasticidin S具有耐受性，可以用低盐LB培养基（pH8）进行筛选，添加100 μg/ml Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。推荐使用InvivoGens Fast-Media®Blas以获得Z好结果。
2）哺乳动物细胞（推荐浓度：1-50 µg/ml）
哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1-50 μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定使用浓度。
一些哺乳动物细胞的建议工作浓度：

细胞	种属	组织	培养基	Blasticidin S Concentration（μg/ml）
HeLa	Human	Uterus	DMEM	3-10
293	Human	Kidney	DMEM	3-10
B16	Mouse	Melanoma	RPMI	3-10
PC1.0	Hamster	Adenocarcinoma	RPMI	10-30

操作步骤（哺乳动物稳转株筛选）：
Blasticidin S通常使用浓度为10 μg/ml。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞中，在含有Blasticidin S的正常生长培养基中孵育，用于筛选稳定转染细胞株。
（1）转染后48h，用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代；（注：细胞处于活跃分裂期时抗生素工作Z好。细胞密度太高，抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率Z好不超过25%）
（2）每3-4天去除培养基，加入含抗生素的新鲜培养基；
（3）7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率，集落形成可能需要再增加一周或更久。
（4）转移5-10个耐受克隆到35mm细胞盘中。加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。
Invivogen Blasticidin S的应用和具体浓度：

物种	细胞系/株	载体/质粒	Blasticidin S Concentration （μg/ml）
E. coli	MIC128	pHASH102	250
B.subtilis	RM125	pGETS109	500
P. falciparum	3D7/GC03 parasites	pLN-ACP-V5	2.5
Dictyostelium discoideum	DAip1-null	pBsr2	10
Rat	NIH3T3	pcDNA6.2	5
Human	HeLa	pEF-BOS	2
Human	LLCMK2	SeVdp	5
Human	293	pOG44	15
Mouse	B16	pCMVβ	50
Mouse	B16	pBLAST	50

另Invivogen提供携带bsr基因的质粒产品：

质粒名称	抗性基因	货号	规格	产地
pSELECT-blasti-mcs	bsr	psetb-mcs	20μg	invivogen
pSELECT-blasti-LacZ	bsr	psetb-lacz	20μg	invivogen
pMONO-blasti-mcs	bsr	pmonob-mcs	20μg	invivogen
pMONO-blasti-gfp	bsr	pmonob-gfp	20μg	invivogen
pVITRO1-blasti-mcs	bsr	pvitro1-bmcs	20μg	invivogen
pVITRO1-blasti-GFP/LacZ	bsr	pvitro1-bgfplacz	20 μg	invivogen
pVITRO2-blasti-mcs	bsr	pvitro2-bmcs	20μg	invivogen
pVITRO2-blasti-GFP/LacZ	bsr	pvitro2-bgfplacz	20μg	invivogen
psiRNA-h7SKblasti G1 Kit	bsr	ksirna3-b21	1 Kit	invivogen
pCpGfree-vitroBmcs	bsr	gvtb-mcsg2	20μg	invivogen
pCpGfree-vitroB	bsr	gvtb-lz	20μg	invivogen