易栓症检测试剂: AT, PC, PS

 
易栓症的实验室诊断
 

 
 
易栓症的简介：
 
 

• 定义:  易栓症可被定义为容易形成静脉血栓的倾向

 
 

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• 1. 有诱发危险因素或者没有诱发危险因素（无诱发因素，自发性的静脉血栓，特发性静脉血栓）
  2. 单发性的或者反复发作
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• 遗传性易栓症

• 临床:静脉血栓
• 自发的 或 无血栓危险因素
• 通常为下肢深静脉血栓,肺栓塞,浅表血栓性静脉炎，有时也发生在其它位置
• 首次发病多在年轻时，小于60岁*
• 有血栓家族遗传史*
• 反复发病*
  • 抗APC病人中不明显     
• 孕期或者围产期静脉血栓
• 服用避孕药或者激素替代ZL时静脉血栓
• 纯合子，双杂合子（两个不同突变在同一个基因），混合杂合子（2个突变在两个不同基因上）比杂合子更易发血栓。

• 获得性易栓症

• 没有家族史

• 遗传性和获得性易栓症

• 临床症状重于单独的遗传性或者获得性易栓症

 
 

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• 高危：
  • 石膏固定
  • 下肢骨折
  • 超过30分钟的全麻手术
  • 三个月内超过3天的卧床
  • 两年内的活动性的癌症
  • 肾病综合症
  • 大的创伤
  • 弥散性血管内凝血

 
 

• 中危
  • 怀孕
  • 围产期
  • 老年
  • 深静脉血栓前1年内口服避孕药或激素替ZL
  • 超过六个小时的旅行

 
 

• ZL
  • 口服避孕药
  • 激素替代ZL
  • L-asparaginase（L天门冬酰胺酶）
  • 肝素 (HIT，肝素介导的血栓性血小板减少症)

 
 

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• 遗传性易栓症

（在不同人群有较大差别）
 
 

• 遗传性抗凝蛋白缺陷
  • 抗凝血酶(AT)
  • 蛋白 C (PC)
  • 蛋白S (PS)
  • AT, PC and PS在肝脏合成，调节血栓形成
  • AT, PC and PS 活性水平
    • AT 出生时相当于成人的50%
    • 完全成熟: AT and PS at 6 month, PC 在3到4岁

 

纯合子蛋白C缺陷

 
 

• 活化蛋白C抵抗 (APC-R)
  • FV Leiden突变 (FV p.506R>Q
  • 其他FV 多态性: FV Hong Kong, FV Cambridge, I369T and H1299R
  • FV p.666E>D: 一个ZG家族 的新的突变/多态性
  • 没有发现基因突变的APC-R，不明确的异常突变
  • 活化蛋白C: 灭活活化的FV (FVa)和FVIII (FVIIIa)
  • 蛋白C抵抗: 活化蛋白C活性下降

 
 

• FII的多态性: FII 20210G>A

 
 

• 其他:

 
 

• 高同型半胱氨酸血症: 特别是神经学方面的临床标新
• FVIII活性增加: 不确定

 
 

• 获得性易栓症

 
 

• 狼疮抗凝物 (LAC)/ 抗磷脂抗体

• LAC: 一组不同来源地免疫球蛋白，在体外干扰依赖磷脂的实验结果
• 抗心磷脂抗体: aCL
• 抗-beta2-糖蛋白I: anti-β2GPI

这些抗体在抗磷脂综合症中可以被发现
 
易栓症实验室诊断项目:
 
 

• 初步过筛

• 抗凝血酶、蛋白C、蛋白S、活化蛋白C抵抗/因子V雷登突变、狼疮抗凝物（LA）和抗磷脂抗体（APA）

 
 

• 次级过筛

• 纤维蛋白原、凝血酶原基因突变，高胱氨酸血症
• 纤溶参数：总纤溶能力、纤溶酶原、纤溶酶原激活物YZ物-1（PAI-1）、组织型纤溶酶原激活物（tPA）、静脉闭塞实验

 
 

• 其他检查

• 升高的凝血因子，如：因子VIII

• 凝血标志物，如：D-二聚体
• 其他凝血组分，如：

        -TFPI（游离和总的）
-sEPCR
-因子XII
 
 

• 谁需要易栓症的检测

 
 

• 上述提到的易栓症危险因素，特别是无原因的60岁以前的无原因的静脉栓塞和多次复发
• 孕期妇女:

• VTE发病史
• 其他临床症状也应该加以考虑，如大于2次的死胎，以及部分先兆子痫，后位胎盘血肿和宫内发育停滞(recurrent (>2) early fetal losses, and in some cases pre-eclampsia, retro-placental haematoma, in utero growth retardation)

• 家族成员: 建议，没有共识，发现危险因素
  • 小于60岁，寻找是否存在先证者存在的危险因素
  • 如果阳性: 其他危险因素(合并危险因素)
  • 女性，先证者的姐妹和子女，口服避孕药或怀孕之前

 
 

• 什么时间合适

 
 

• 维生素K拮抗剂不ZL期间: 所有测试
• 维生素K拮抗剂ZL期间: 除 PC 和PS 活性之外的其他测试
• 肝素ZL期间: AT 之外的其他测试

 
!! 如果在维生素拮抗剂ZL期间，PC 和PS水平下降，肝素ZL期间AT水平下降，如果需要通过血浆检测确证这些抗凝蛋白的缺陷，至少需要停药两个月后
 
易栓症的实验室诊断流程：
 
AT, PC 和PS的遗传性缺乏缺乏在亚洲人群中，包括ZG人群是引起静脉栓塞的重要原因。
 
 

• 的诊断流程

 

没有AT缺陷

重新采集标本检测，确认异常结果 + 抗原检测

正常                     异常    > 80%                  < 80%

AT(发色底物法)

正常                异常                    >  80%            < 80%                    确认差异          AT缺陷       质量缺陷（罕见）

AT缺乏推荐诊断流程

+ 易栓症诊断 标准

抗原检测

活性检测

 
 
 
 
 
 

• 的诊断流程

 

 

没有PC缺陷

重新采集标本检测，确认异常结果 + 抗原检测

正常                     异常    > 70%                  < 70%

PC(凝固法或者发色底物法)

正常                异常                    >  70%            < 70%                                             PC数量缺陷       抗原测定Asserachrom® PC

PC缺乏推荐诊断流程

+ 易栓症诊断 标准

抗原检测

活性检测

数量正常但结构异常，活性降低

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

• 的诊断流程

 

 

PC缺乏推荐诊断流程

没有PS缺陷

重新采集标本检测，确认异常结果 + 抗原检测

正常                     异常    > 65%     男性             < 65%

PS(凝固法)

正常                异常                    >  65%            < 65%                                             PS数量缺陷       抗原测定Liatest FreePS 抗原检测

PS缺乏推荐诊断流程

+ 易栓症诊断 标准

抗原检测

活性检测

数量正常但结构异常，活性降低

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Stago 易栓症诊断产品线
 
 

	异常	试剂
遗传性易栓症	Protein C	STA® -Staclot® Protein C STA® -Stachrom® Protein C Asserachrom® Protein C
	Protein S	STA® -Staclot® Protein S STA® - Liatest Free Protein S Liatest® Protein S Asserachrom® Free Protein S Asserachrom® Total Protein S Liatest® C4b -BP (research)
	Antithrombin	STA® -Stachrom® AT III 3 STA® -Stachrom® AT III 6 Liatest® AT III
	APC-R (FV Leiden)	STA® Staclot® APC-R

 
Stago提供完整的易栓症实验室诊断产品线提高易栓症的诊断水平。
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ZG人群的易栓症研究
 
ZG实验室和临床诊断所使用的AT，PC和PS的正常值范围来源于欧洲人群的数据，由于人种的差异，这些数据和ZG人的实际情况是否符合一直没有明确的证据，一直没有大规模的ZG人群的调查来确定ZG人的正常值参考范围，这样给疾病的诊断带来很多困难，同时也不知道AT，PC和PS的正常值参考范围是否受到年龄和性别的影响。
 
      Staga和ZGZ的四家血栓与止血领域领先的医院合作，推动了ZG人群正常值参考范围的建立。
    
 

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• ZG志愿者总人数:   N=3,493
• 年龄范围: 17~83 岁
• 1733 名男性 和1760 名女性
• 3600名参与者，107名由于肝肾疾病被排除
• 738名献血员样本和2755名成人

 
 

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•  , 用 Stago 检测系统(仪器 + 试剂)检测蛋白S活性,蛋白C活性和AT活性水平
  1. AT试剂为：STA®-Stachrom® AT
     PC试剂为：STA®-Stachrom® PC
  2. PS试剂为： STA®-Staclot® PS
  3. APCR试剂为： STA®-Staclot® APC-R
  4. 仪器：Stago STA-R 全自动血凝分析仪
•  Stago的试剂），来对疾病进行确诊
  1. Liatest AT
  2. Asserachrom PC
  3. Asserachrom Total PS 和Asserachrom Free PS

 
 

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ZG人群的AT, PC 和PS的正常参考范围

 
 

 

Protein C activity

Protein S activity

Antithrombin activity

APC-Resistance

 

图，蓝点和蓝线代表女性，红点和红线代表女性，X轴为年龄，Y轴为项目（PC， PS，AT和APCR）的结果

 
 
 

 

• PC， PS和AT的参考值范围在不同的年龄段受到性别的很大影响
• 和PS男性在50岁前明显高于女性
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• S,蛋白C和抗凝血酶缺乏的筛查

     (3493名受试者)
 
 

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• C, 蛋白S和抗凝血酶AT缺陷的发生率不低于西方国家的数据

 
REFERENCE
 
1.Miyakis S, Lockshin MD, Atsumi T, et al. International consensus statement on an update of the classification criteria for definite antiphospholipid syndrome (APS). J Thromb Haemost 2006, 4: 295-306.
 
2.Pengo V, Tripodi A, Reber G, et al. Update of the guidelines for lupus anticoagulant detection. J Thromb Haemost 2009, 7: 1737-40
 
3.Cai H, Hua B, Fan L, et al. A novel mutation (G2172 to C) in the factor V gene in a Chinese family with hereditary activated protein C resistance. Thromb Res 2010, 125: 545-8.
 
4.Zhu T, Ding Q, Bai X, et al. Normal ranges and genetic underlying variants of antithrombin, protein C and protein S in the general Chinese population. Results of the Chinese Hemostasis Investigation on Natural Anticoagulants Study I Group. Haematologica 2011, 96:1033-40.